《食品中霉菌和酵母快速计数 测试片法》.docxVIP

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CCSC53

团体标准

T/CIQA125—2025

食品中霉菌和酵母快速计数测试片法

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2025-07-04发布2025-07-04实施

中国出入境检验检疫协会发布

T/CIQA125—2025

食品中霉菌和酵母快速计数测试片法

1范围

本文件规定了食品中霉菌和酵母测试片快速计数的方法。

本文件适用于食品中霉菌和酵母的快速计数。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB4789.1食品安全国家标准食品微生物学检验总则

GB4789.15食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数

GB4789.25食品安全国家标准食品微生物学检验酒类、饮料、冷冻饮品采样和检样处理

GB4789.28食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB19489实验室生物安全通用要求

3术语和定义

GB4789.15中界定的术语和定义适用于本文件。

4检测原理

MicroFast?1)霉菌酵母测试片法是用一种预先制备的含有指示剂及冷水可溶性凝胶的培养基系统进行微生物培养的方法。培养基中含有霉菌和酵母生长的主要营养物质和功能性物质（如显色底物、冷水可溶性凝胶等）。霉菌和酵母生长过程中代谢产生的酶与测试片中的显色底物发生特异性反应释放显色基团，随霉菌和酵母生长，显色集团不断积累，显色效应逐渐增强，最终形成可见光下可计数的蓝绿色菌落。冷水可溶性凝胶遇水形成凝胶层，起固定营养与隔离保护作用。

1)MicroFast?霉菌酵母测试片是由山东美正生物科技有限公司提供的产品的商品名。给出这一信息是为了方便本文件使用者。如果其他产品具有相同的效果,那么可使用这些等效的产品。

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5设备和材料

除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：

5.1恒温培养箱：28℃±1℃。

5.2电子天平：感量0.1g。

5.3pH计或精密pH试纸。

5.4均质器（拍击式）或等效的设备、无菌均质袋。

5.5旋涡振荡器。

5.6无菌移液管：1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)无菌移液管或移液器及无菌吸头。

5.7无菌滤膜（直径47mm，孔径0.45μm）。

5.8无菌锥形瓶（或其他合适容器）。

5.9测试片压板装置。

5.10膜过滤装置。

5.11菌落计数装置：放大镜或低倍镜或全自动菌落计数仪等。

5.12恒温装置：46℃±1℃。

6培养基和试剂

6.1MicroFast?霉菌酵母测试片：见附录A.1、附录B。

6.2磷酸盐缓冲液：见附录A.2。

6.3生理盐水：见附录A.3。

6.4高酶活性样品专用稀释液：见附录A.4。

6.51mol/L氢氧化钠溶液：见附录A.5。

6.61mol/L盐酸溶液：见附录A.6。

6.7沙氏葡萄糖琼脂：见附录A.7。

6.8沙氏葡萄糖肉汤：见附录A.8。

6.9胰酪大豆胨液体培养基：见附录A.9。

7检验程序

具体操作程序见图1。

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T/CIQA125—2025

固体、半固体、液体样品

固体、半固体、液体样品

25g(mL)样品+225mL

稀释液，均质

10倍递增系列稀释

选择2个~3个适宜稀释度的样品匀液

取1mL加入测试片，每个稀释度做2个平行

28℃±1℃48h±2h

菌落计数

报告

采用膜过滤方式前处理的样品

47mm×0.45μm

50mL或其他规定的体积抽滤，再用15mL稀释液冲洗

贴滤膜

取1mL稀释液润湿测试片，做2个平行

含较高活性酶的样品

25g(mL)样品+225mL

高酶活性样品专用稀释液，

均质

10倍递增系列稀释

选择2个~3个适宜稀释度的样品匀液

图1食品中霉菌和酵母快速计数测试片法操作程序

8操作步骤

8.1样品的稀释

8.1.1固体、半固体、液体样品：取25g(mL)样品，