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喷他佐辛通过Sigma-1R调控ERS/IRE1α/XBP-1s通路减轻SH-SY5Y

细胞OGD/R损伤的机制研究

摘要

目的

Cerebralischemia-reperfusioninjury,CIRI

通过体外模拟脑缺血再灌注损伤（）

建立SH-SY5Y细胞氧糖剥夺-复氧复糖（Oxygen-glucosedeprivationand

restoration,OGD/RPentazocine,PTZSH-SY5Y

）模型，探讨喷他佐辛（）在减轻

细胞氧糖剥夺-复氧复糖损伤中的作用及其机制。

方法

将生长良好的SH-SY5Y细胞随机分为正常对照组（Control组）、氧糖剥夺-

OGD/ROP

复氧复糖组（组）、氧糖剥夺-复氧复糖+喷他佐辛组（组）、氧糖剥

夺-复氧复糖+喷他佐辛+Sigma-1受体（Sigma-1receptor,Sigma-1R）抑制剂

BD1047OPB4470%-80%OGD/R

组（组）共组。组细胞培养至密度达时，将

组、OP组和OPB组培养基更换为无糖的EBSS缓冲液，氧糖剥夺处理4h后将

EBSS18hOP

缓冲液更换为正常培养基复氧复糖处理；组复氧复糖时加入喷他

佐辛（终浓度10μmol/L），OPB组复氧复糖时加入喷他佐辛（终浓度10μmol/L）

和Sigma-1R抑制剂BD1047（终浓度20μmol/L）。经上述处理完成造模后，采

用细胞计数试剂-8（Cellcountingkit-8，CCK-8）法检测细胞存活率，采用流式

细胞仪检测细胞凋亡率，免疫荧光染色检测Sigma-1R蛋白表达，Westernblot

法检测Sigma-1R、C/EBP同源蛋白(C/EBP-Homologous,CHOP)、磷酸化需肌

1αPhospho-Inositol-Requiringenzyme1α,p-IRE1αX

醇酶（）、剪接型-框结合蛋

白1（X-Boxbinding-1s,XBP-1s）和活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved-

Caspase-3,c-cas-3)的蛋白表达。

结果

1.OGD/ROPP

与组比较，组细胞活性增加，差异具有统计学意义（＜

0.05），说明喷他佐辛具有减轻氧糖剥夺-复氧复糖对SH-SY5Y细胞造成损伤的

保护作用。

2.与OGD/R组比较，OP组细胞凋亡率降低，c-cas-3蛋白表达下调，差异

P0.05OPOPBc-cas-3

具有统计学意义（＜）；与组比较，组细胞凋亡率升高，

表达上调，差异具有统计学意义（P＜0.05），说明喷他佐辛减轻氧糖剥夺-复氧

复糖对SH-SY5Y细胞造成的损伤与抑制细胞凋亡有关。

3.与OGD/R组比较，OP组Sigma-1R蛋白表达上调，差异具有统计学意义

P0.05OPOPBSigma-1R

（