实验三乳酸菌菌种保藏36课件.pptxVIP

实验三乳酸菌菌种保藏

知细菌的保藏流程

知识目标

技能目标

能采用甘油保藏法保藏菌种

素质目标

会无菌操作

实验背景：

乳酸杆菌是可使葡萄糖等糖类分解为乳酸的各种细菌的总称

乳酸杆菌

斜面低温保藏法：将现有的菌种接入空白斜面培养基中，在合适培养条件下培养，得到生长旺盛的菌种时，做好标记，置于4℃冰箱保藏。

冷冻保藏法

从试管斜面取2~3环菌苔于5mlMRS液体培养基中，培养过夜（10~14h）即为对数生长中期至后期细菌，将5ml菌液8000rpm离心1min收获菌体沉淀，弃上清；

实验准备（灭菌），以下为每组准备事情：

1、4支试管，每支试管内装5mlMRS琼脂培养基，包扎。

2、8个甘油管，每管甘油管装50%的甘油，装量为0.5ml。

3、1ml枪头1盒

以上在121℃灭菌20min。

121℃灭菌20min

上次作业回顾

1、结果如何撰写？

2、讨论如何撰写？

16sRNA比对演示

实验

1、摆斜面

2、制作甘油管

甘油管制作：

1、在500μl灭菌的50％甘油管中，加入500μl的培养液，培养液OD值约在0.6-0.8之间。

混匀，使甘油终浓度为20%；

分装入冷冻指管或安瓿中，于-80℃超低温冰箱中保藏。

操作：

1、准备灭菌试剂：

a.装有50%浓度的甘油管4个

b.MRS液体培养基50ml

2、斜面培养基