【优选】结核分枝杆菌实验室检测方法PPT资料.pptVIP

结核分枝杆菌实验室检测方法;分枝杆菌属;结核分枝杆菌群;非典型分枝杆菌;麻风分枝杆菌;全球约有1/3的人口已经感染结核分枝杆菌，有2000万活动性肺结核患者，每年新发病例900万人，每秒钟有1人感染结核，每年有300万人死于结核病。

随着抗结核药物的不断发展和卫生生活状况的改善，结核的发病率和死亡率曾一度大幅下降

20世纪80年代后，由于艾滋病和结核分枝杆菌耐药菌株的出现、免疫抑制剂的应用、吸毒、贫困及人口流动等因素，全球范围内结核病的疫情骤然恶化;生物学形状;培养特性;实验室检测方法;涂片镜检--抗酸染色;抗酸染色局限性;发光二极管荧光显微镜（LED）;分枝杆菌培养技术;对活动性结核的诊断灵敏度高达77％，

102个菌/反应（NTM）

特异性差．各种分枝杆菌均可生长。

被认为是近十年来结核诊断史上取得的最重要成就，该检测方法的原理是：结核感染后体内长期存在抗原特异性的记忆性Ｔ细胞，当再次遇到抗原刺激时，能迅速活化增值，释放γ干扰素。

血清学试验检测结核抗原或抗体不太理想

20世纪80年代后，由于艾滋病和结核分枝杆菌耐药菌株的出现、免疫抑制剂的应用、吸毒、贫困及人口流动等因素，全球范围内结核病的疫情骤然恶化

偶发分枝杆菌、龟分枝杆菌龟/脓肿、胞内分枝杆菌、鸟分枝杆菌、戈登分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、偶然分枝杆菌、瘰疬分枝杆菌、浅黄分枝杆菌、土分枝杆菌、草分枝杆菌、不产色分枝杆菌、海-溃疡分枝杆菌、金色分枝杆菌、苏尔加分枝杆菌、蟾蜍分枝杆菌等

一类细长略带弯曲，有时呈分枝状的杆菌，本属细菌多具有抗酸性，又称抗酸杆菌（acid-fastbacillus），细菌体内含有分枝菌酸，细胞壁含有大量脂类，这与分枝杆菌的染色性、抵抗力和致病性等密切相关。

研究、应用报道较多的结核病基因诊断技术主要包括聚合酶链反应(PCR)、核酸探针杂交、DNA序列测定、基因芯片、基因分型等。

抗酸染色对分枝杆菌非特异，其他如Nocardia（奴卡）、Rhodococcus（红球菌属）、Legionellamicdadei（军团菌）、cryptosporidium（隐孢子虫）、Isospora（等孢球虫）等有抗酸菌特点

20世纪80年代后，由于艾滋病和结核分枝杆菌耐药菌株的出现、免疫抑制剂的应用、吸毒、贫困及人口流动等因素，全球范围内结核病的疫情骤然恶化;固体培养和液体培养优缺点;血清学试验;免疫学检测方法;局限性：;γ干扰素释放试验;分子生物学检测方法;MDR早期诊断;高效：一个样本可同时检测结核分枝杆菌和NTM

快速：4周（菌培）3小时

灵敏：10个菌/反应（TB）；102个菌/反应（NTM）

;高效：同时检测17种分枝杆菌（包括TB）

快速：＞4周（菌种鉴定）6小时

灵敏：103个菌/反应

;通量：两个一线抗结核药（MDR）

速度：8周（药敏）6小时

灵敏度：103个菌/反应;高效：一个样本可同时检测结核分枝杆菌和NTM

液体培养：菌体与培养基充分接触，生长迅速，但易受到污染

固体培养和液体培养优缺点

萋尼染色呈红色，背景为蓝色；

固体培养：污染少，易于进行菌落形态观察，但是培养时间长

高会霞等，五种结核病实验室检测方法对结核病诊断价值的效果评价.

萋尼染色呈红色，背景为蓝色；

细胞壁中含有大量脂质而不易着色，特别是有

敏感性差，一般1mL痰中有5000-10000条菌时可检出，而培养可检出10-100条菌.

基因芯片快速检测平台

抗酸染色是目前为止最快的结核检出方法，可用来检测病情进展，为感染控制提供参考依据，可确证培养物为阳性

要确定是否为结核菌．需结合分枝杆菌菌种鉴定和药物敏感性试验。

快速：4周（菌培）3小时

要确定是否为结核菌．需结合分枝杆菌菌种鉴定和药物敏感性试验。

基因芯片快速检测平台

102个菌/反应（NTM）

荧光显微镜成本高、易损坏、耗电量大、光源寿命短、显微镜价格昂贵且需要在暗室内工作等，荧光染色法一直没有在结核病痰涂片诊断中得到广泛的应用。;敏感性、特异性比较;罗氏培养和快速培养;快速培养和荧光PCR;总结：;;感谢观看