《畜禽肉中9种生物胺含量的测定 液相色谱法》.docxVIP

ICS67.120

CCSC135

T/NAIA

团体标准

T/NAIA0395—2025

畜禽肉中9种生物胺含量的测定液相色谱法

DeterminationofNineBiogenicAminesinLivestockandPoultryMeatbyHPLC

2025-07-07发布2025-07-30实施

宁夏化学分析测试协会发布

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I

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》规定编写。

本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。

本文件起草单位：宁夏回族自治区食品检测研究院（国家市场监督管理总局重点实验室（枸杞及葡萄酒质量安全））、宁夏回族自治区畜牧工作站、宁夏回族自治区兽药饲料研究所、宁夏化学分析测试协会。

本文件主要起草人：张瑶、郭阳、王泽岚、蒋秋斐、王鹏、卜宁霞、艾琦、刘迎、李强、顾亚荣、吴明、吕毅、马桂娟、张小飞。

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畜禽肉中9种生物胺的测定液相色谱法

1范围

本文件规定了畜禽肉中9种生物胺（色胺、β-苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、章鱼胺、酪胺、精胺、亚精胺）的液相色谱检测方法。

本文件适用畜禽肉中9种生物胺（色胺、β-苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、章鱼胺、酪胺、精胺、亚精胺）的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

试样用5%三氯乙酸提取，正己烷除脂，经丹磺酰氯衍生，反相色谱柱分离，供液相色谱仪测定，外标法定量。

5试剂和材料

本方法所用的试剂，除另有规定外，均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

5.1试剂

5.1.1盐酸：优级纯。

5.1.2丙酮：优级纯。

5.1.3丹磺酰氯（Dans-Cl）：优级纯。

5.1.4碳酸氢钠：优级纯。

5.1.5氨水：优级纯。

5.1.6三氯乙酸：优级纯。

5.1.7甲醇：色谱纯。

5.1.8正己烷：色谱纯。

5.1.90.1mol/L盐酸溶液：取盐酸（5.1.1）0.83mL，用水稀释定容到100mL，混匀。

5.1.105g/LDans-Cl衍生溶液：准确称取丹磺酰氯（5.1.3）0.5g，以丙酮（5.1.2）为溶剂，定容至100mL，混匀，置4℃冰箱避光保存。

5.1.1120g/L碳酸氢钠溶液：准确称取2.0g碳酸氢钠（5.1.4），加水溶解并定容至100mL，混匀。5.1.125%三氯乙酸：称取25g三氯乙酸（5.1.6），用适量水完全溶解后转移至500mL容量瓶中，定容至刻度。

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5.2标准品

9种生物胺标准品名称、化学分子式、CAS号和纯度见附录A。

5.3标准溶液配制

5.3.1标准储备液（10.0mg/mL）：分别准确称取9种生物胺标准物质适量，用0.1mol/L盐酸溶液（5.1.9）溶解并定容至10mL，避光冷藏贮存，保存期限为3个月。

5.3.2混合标准中间液（1.0mg/mL）：分别移取9种生物胺标准储备液1.0mL，用0.1mol/L盐酸溶液定容至10mL，避光冷藏贮存，保存期限为1个月。

5.3.3混合标准工作溶液：分别准确吸取不同体积混合标准中间液，用0.1mol/L盐酸溶液定容至10.0mL，配制成浓度为1.0mg/L、2.0mg/L、5.0mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L、50.0mg/L、100.0mg/L、200.0mg/L的标准工作溶液，临用现配。

6仪器和设备

6.1液相色谱仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器。

6.2天平：感量0.01mg和0.01g。

6.3均质机。

6.4涡旋混合器。

6.5高速离心机：最大转速9000r/min。

6.6水浴装置。

6.7滤膜针头滤器，孔径0.22μm，或相当者。

7分析步骤

7.1试样制备

取适量新鲜或冷冻的供试组织绞碎，充分均质，装入洁净容器，密封，-18℃以下保存。

7.2提取与净化

7.2.1提取

称取5g样品（精确到0.01g）于50mL具塞离心管中，加入