2026届高三高考总复习生物课件-限时练：基因工程的基本工具和操作程序.pptxVIP

;一、选择题

1.(2025·湖北襄阳四中联考)大肠杆菌puC118质粒是基因工程中常用的一种载体，具有氨苄青霉素抗性基因，该质粒中某限制酶的唯一切点位于LacZ基因中。在特定的选择培养基中，若LacZ基因没有被破坏，则大肠杆菌菌落呈蓝色；若LacZ基因被破坏，则菌落呈白色。关于图中操作的叙述正确的是();解析分析题图可知，在加入试管1之前，质粒和目的基因已经被切割，故试管1中应加入DNA连接酶，A错误；

试管2中用Ca2＋处理大肠杆菌使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，B正确；

能在氨苄青霉素培养基中存在的菌落呈现蓝色或白色，C错误；

若大肠杆菌的菌落为蓝色，则导入大肠杆菌的是普通质粒，试管3应选择白色菌落内的大肠杆菌进行扩大培养，D错误。;2.(2025·山东检测)由于PCR扩增出的目的基因末端为平末端，且无合适的限制酶识别序列，需借助中间载体P将目的基因接入载体E。下图为两种载体的结构和相关限制酶的识别序列，下列叙述正确的是();解析由于载体E只有产生黏性末端的酶切位点，要使中间载体P接入载体E，同时防止载体E自身环化，需要用两种限制酶分别切割载体E和中间载体P，据图可知，中间载体P和载体E均含有XhoⅠ和PstⅠ酶识别序列，故可选用XhoⅠ和PstⅠ酶进行酶切，载体P中这两种酶识别序列间含有EcoRⅤ识别位点，并且其切割的为平末端，可以用于连接目的基因，SmaⅠ酶虽然也能切割得到平末端，但是其识别位点不位于XhoⅠ和PstⅠ酶识别位点之间，故不能选择其对中间载体P进行切割，T4DNA连接酶可以连接平末端，A正确，B错误；;不直接选择载体P构建表达载体是因为它不含启动子与终止子，C错误；

受体细胞表现出抗性基因的相应性状，可能是导入了重组质粒，也可能只导入了空质粒(不含目的基因的质粒)，D错误。;3.(2025·山东模拟预测)研究人员用酶M和酶N两种限制酶同时处理某DNA分子和质粒，得到的DNA片段如图所示。图中DNA片段只注明了黏性末端处的碱基种类，其他碱基的种类未注明。下列叙述错误的是();解析该DNA分子经酶M和酶N两种限制酶切割后，产生了三个DNA片段且两个切口形成的黏性末端不同，说明该DNA分子???有酶M的一个切割位点和酶N的一个切割位点；质粒为环状DNA，其经酶M和酶N两种限制酶切割后，产生了两个DNA片段，观察两个切口形成的黏性末端，可推出质粒含有酶M的一个切割位点和酶N的一个切割位点，A正确；;图中经酶切后形成的片段均是黏性末端，T4DNA连接酶和E.coliDNA连接酶均可以连接，C正确；

根据图中黏性末端可知，片段乙、片段丁、片段戊三个片段不能连接形成一个环状DNA分子，D错误。;4.(2025·北京朝阳模拟)酵母人工染色体pYAC2是以酵母菌为受体细胞构建基因文库时的常用载体。下图为pYAC2的结构示意图，导入受体细胞前用限制酶BamHⅠ切割可使其成为线性的染色体。pYAC2适配的受体菌菌落呈红色，sup4基因表达能够抑制其性状表现，使菌落呈白色。下列相关叙述错误的是();解析pYAC2上含有TRP1(色氨酸合成酶基因)，故导入pYAC2的受体菌能够合成色氨酸，能够在不含色氨酸的培养基中生存，A正确；

pYAC2上有两个BamHⅠ切割位点，用BamHⅠ切割后，pYAC2成为线性的染色体，TEL端粒序列位于染色体的两端，B正确；

着丝粒是确保细胞分裂时染色体正确分离的重要结构，pYAC2上的CEN4(着丝粒序列)可防止pYAC2在细胞分裂中丢失，C正确；

分析题图可知，目的基因插入会破坏sup4基因，导致sup4基因不能表达，故将带有目的基因的重组pYAC2导入受体菌后应挑选红色菌落，D错误。;5.(不定项)(2025·山东泰安模拟预测)为使玉米获得抗除草剂性状，科研人员进行了相关操作(如图所示)。含有内含子的报告基因不能在原核生物中正确表达，其正确表达产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中愈伤组织表面常残留农杆菌，会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。下列叙述错误的是();解析农杆菌中的Ti质粒上的T－DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上，根据农杆菌的这一特点，将目的基因(基因G)插入到Ti质粒的T－DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因(基因G)整合到愈伤组织细胞的染色体DNA上，A正确；

农杆菌属于原核生物，含有内含子的报告基因不能在原核生物中正确表达，故不会出现农杆菌的蓝色菌落，B错误；;根据题意可知，报告基因的产物能催化无色物质K呈现蓝色，而愈伤组织表面残留的农杆菌会导致未转化的愈伤组织能在含除草剂的培养基中生长，因此利用物质K和除草剂进行筛选2，更易于获得抗除草剂的转基因植株，C正确；

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