2024年高中生物选修三全套知识点填空.docVIP

选修3易考知识点背诵

专题1?基因工程

基因工程的概念

基因工程的别名

?基因拼接技术或DNA重组技术

操作环境

?生物体外

操作对象

?基因

操作水平

?DNA分子水平

基本过程

?剪切→拼接→导入→体现

成果

?产生人类需要的基因产物

特点

?打破种的界限，定向改造生物

本质

?基因重组

（一）基因工程的基本工具

1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）

（1）起源：重要是从原核生物中分离纯化出来的。

（2）功效：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具备特异性。

（3）成果：经限制酶切割产生的DNA片段末端一般有两种形式：黏性末端和平末端。

2.“分子缝合针”——DNA连接酶

(1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：

①相同点：都缝合磷酸二酯键。

②区分：E·coliDNA连接酶起源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。

(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已经有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。

3.“分子运输车”——载体

（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。

②具备一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。

③具备标识基因，供重组DNA的判定和选择。

（2）最常用的载体是质粒,它是一个裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具备自我复制能力的双链环状DNA分子。

（3）其他载体：噬菌体、动植物病毒

(二)基因工程的基本操作程序

第一步：目标基因的获取

1.目标基因是指：是人们所需要转移或改造的基因

2.获取目标基因的措施基因文库、人工合成、PCR技术

3.原核基因采取直接分离取得，真核基因是人工合成。人工合成目标基因的常用措施有反转录法_和化学合成法_。

4.PCR技术扩增目标基因

（1）原理：DNA双链复制

（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。

第二步：重组DNA分子

1.目标：使目标基因在受体细胞中稳定存在，并且能够遗传至下一代，使目标基因能够体现和发挥作用。

2.组成：目标基因＋开启子＋终止子＋标识基因+复制原点

（1）开启子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最后取得所需的蛋白质。

（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。

（3）标识基因的作用：是为了判定受体细胞中是否含有目标基因，从而将含有目标基因的细胞筛选出来。常用的标识基因是抗生素基因。

第三步：转化受体细胞

1.转化的概念：是目标基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和体现的过程。

2.常用的转化措施：

将目标基因导入植物细胞：采取最多的措施是农杆菌转化法，其次尚有基因枪法和花粉管通道法等。

将目标基因导入动物细胞：最常用的措施是显微注射技术。此措施的受体细胞多是受精卵。

将目标基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化措施是：先用Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组体现载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸取DNA分子，完成转化过程。

3.重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因体现载体受体细胞的依据是标识基因是否体现。

第四步：目标基因的检测和体现

1.首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目标基因，措施是采取DNA分子杂交技术。

2.其次还要检测目标基因是否转录出了mRNA，措施是采取用标识的目标基因作探针与mRNA杂交。

3.最后检测目标基因是否翻译成蛋白质，措施是从转基因生物中提取蛋白质，用对应的抗体进行抗原－抗体杂交。

4.有时还需进行个体生物学水平的判定。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。

（三）基因工程的应用

1.植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质。

2.动物基因工程：提升动物生长速度、改进畜产品品质、用转基因动物生产药物。

3.基因治疗：把正常的外源基因导入病人体内，使该基因体现产物发挥作用。

（四）蛋白质工程的概念

蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功效的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对既有