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PCR测定中常见问题分析.ppt

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    样本的制备----核酸纯化一般原理：均使用去垢剂(如Triton-100)裂解细胞，用一种蛋白裂解酶(如蛋白酶K)消化结合于核酸的蛋白质，从而将靶核酸从细胞内释放出来。一般步骤：去垢剂裂解--蛋白酶处理--有机溶剂提取--乙醇沉淀等步骤。纯化目的：核酸的分离纯化就是要将蛋白、脂类等干扰核酸扩增的物质去除。1.核酸提取方法样本的制备----核酸纯化纯化质量评价：抑制物的去除来自样本--血红素及其代谢产物、痰中酸性多糖和糖蛋白成份、降解靶核酸的核酸酶等。来自提取过程--乙二胺四乙酸(EDTA)、去垢剂如十二烷基硫酸盐(SDS)和chaotrope

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