生物化学课件蛋白质的生物合成.ppt

氨酰-tRNA合成酶特点对氨基酸有极高的专一性，每种氨基酸都有专一的酶，只作用于L-氨基酸，不作用于D-氨基酸对tRNA具有极高专一性具有校对功能：氨酰-tRNA合成酶的水解部位可以水解错误活化的氨基酸活化一个氨基酸消耗2分子ATP第62页，共110页，星期日，2025年，2月5日N-甲酰甲硫氨酰-tRNAiMet的形成Met-tRNAiMetfMet-tRNAtMetN10-CHO-FH4FH4转甲酰酶CHO-HN-CH-COO-tRNACH2CH2SCOO-+H2N-CH-COO-tRNACH2CH2SCOO-第63页，共110页，星期日，2025年，2月5日肽链合成起始识别mRNA的起始密码子为AUG，AUG对应的氨基酸为Met。有两种甲硫氨酸专一性的tRNA：tRNAiMet—只与起始密码子结合tRNAMet—只与肽链内部的AUG有关在原核生物中，多肽链起始的氨基酸均为甲酰甲硫氨酸。第64页，共110页，星期日，2025年，2月5日原核生物肽链合成的起始30S亚基?mRNAIF3-IF1复合物30S?mRNA?GTP-fMet–tRNA-IF2-IF1复合物70S起始复合物codonanticodonA位P位mRNA+30S亚基-IF3IF2-GTP-fMet-tRNAIF350S亚基IF2+IF1+GDP+PiIF1A位IF-35?3?IF2GTPP位IF3IF2IF1IF-170S起始复合物第65页，共110页，星期日，2025年，2月5日起始因子在翻译的起始阶段，还需有3种蛋白质因子——起始因子(IF)的参与，即IF1、IF2、IF3。IF1IF2IF3辅助IF3有GTP酶活性特异识别fmet-tRNAimet形成fmet-tRNAimet-IF2-GTP促进30S小亚基结合mRNA终止时：促使核糖体解离第66页，共110页，星期日，2025年，2月5日三元复合物

(trimercomplex)的形成核糖体30S小亚基附着于mRNA的起始信号部位，该结合反应是由起始因子3(IF3)介导的，另外有Mg2+的参与。故形成IF3-30S亚基-mRNA三元复合物氨基酸羧基通过酸酐键与AMP上的5?-磷酸基相连酶：氢键第67页，共110页，星期日，2025年，2月5日30S前起始复合物

(30Spre-initiationcomplex)形成在起始因子2(IF2)的作用下，甲酰蛋氨酸-起始型tRNA(fMet-tRNAMet)与mRNA分子中的起始密码子(AUG或GUG)相结合，即密码子与反密码子相互反应。同时IF3从三元复合物脱落，形成30S前起始复合物，即IF2-30S亚基-mRNA-fMet-tRNAMet复合物。此步亦需要GTP和Mg2+参与第68页，共110页，星期日，2025年，2月5日70S起始复合物

(70Sinitiationcomplex)形成50S亚基与上述的30S前起始复合物结合，同时IF2脱落，形成70S起始复合物，即30S亚基-mRNA-50S亚基-fMet-tRNAMet复合物。此时fMet-tRNAMet占据着50S亚基的肽酰位(peptidylsite，简称为P位或给位)，而50S的氨基酰位(aminoacylsite，简称为A位或受位)暂为空位第69页，共110页，星期日，2025年，2月5日起始复合物的结构此时核糖体的P位被起始氨酰-tRNA占据，A位空着，等待能与第二个密码子匹配的氨酰-tRNA进位。第70页，共110页，星期日，2025年，2月5日S.D序列原核生物-----S.D序列（核蛋白体结合位点，RBS）第71页，共110页，星期日，2025年，2月5日肽链延长这一阶段是在fMet（或肽链）的C末端逐个的添加aa，使肽链不断延伸每延伸一个aa，需要经历三步：

1）进位

2）转肽

3）移位第72页，共110页，星期日，2025年，2月5日12122323进位肽键形成移位进位(Tu\Ts)GTPGTPN-端235′3′C-端肽键形成15′3′（EF-G）肽链的延长第73页，共110页，星期日，2025年，2月5日核蛋白体循环——进位氨基酰-tRNA与结合因子EF-Tu-GTP结合，GTP水解释放能量推动氨基酰-tRNA进位与密码子结合Tu-GTP再生：Tu-GDP释放，延长因子Ts与Tu结合致使GDP释放，GTP与Tu结合使Ts释放每引进一个氨基酰-tRNA消耗一个GTP进位