2025年综合类-临床医学检验技术(士)-流式细胞仪分析技术及应用历年真题摘选带答案(5卷单选一百题.docxVIP

2025年综合类-临床医学检验技术(士)-流式细胞仪分析技术及应用历年真题摘选带答案(5卷单选一百题)

2025年综合类-临床医学检验技术(士)-流式细胞仪分析技术及应用历年真题摘选带答案(篇1)

【题干1】流式细胞仪中用于激发荧光染料的激光光源波长通常为多少？

【选项】A.355nmB.488nmC.633nmD.1064nm

【参考答案】B

【详细解析】488nm的激光（蓝绿光）广泛用于激发FITC、PE-Cy5等常见荧光染料。355nm（紫外光）主要用于激发Cy5、AlexaFluor647等长波长染料，而633nm（红光）多用于HeLa细胞核染料（如DAPI）。1064nm为红外激光，用于光学避光。本题考察对激光波长与荧光染料匹配关系的掌握。

【题干2】流式细胞术门控技术的主要目的是什么？

【选项】A.提高仪器分辨率B.区分活/死细胞C.消除背景荧光D.校准仪器精度

【参考答案】B

【详细解析】门控技术通过设定阈值筛选特定细胞群体（如活细胞膜完整性），排除非目标细胞（如凋亡或碎片）。选项A是激光束的质量控制方法，C需通过荧光补偿矩阵解决，D属于仪器校准环节。本题测试对门控核心功能的理解。

【题干3】流式细胞术样本制备中，用于去除颗粒杂质的关键步骤是？

【选项】A.过滤0.22μm滤膜B.离心10min×1500rpmC.免疫标记D.固定

【参考答案】A

【详细解析】0.22μm滤膜可有效去除红细胞残骸、血小板等颗粒物质（直径＞0.22μm）。离心虽能浓缩细胞但无法解决颗粒污染，免疫标记和固定属于后处理步骤。本题考察样本前处理核心操作。

【题干4】流式细胞仪分析中，当两个荧光通道的信号产生光谱重叠时，应使用哪种技术解决？

【选项】A.调整激光强度B.补偿矩阵C.增加样品浓度D.改变电压阈值

【参考答案】B

【详细解析】补偿矩阵通过数学运算校正重叠信号（如PE和APC的荧光交叉干扰），而调整激光强度影响整体信号强度。增加样品浓度可能导致信号饱和，电压阈值调整仅影响单通道灵敏度。本题测试光谱补偿的关键作用。

【题干5】流式细胞仪细胞分选的判定标准中，哪项不属于细胞活性评估依据？

【选项】A.膜完整性（7-Aminomethylcoumarin）B.细胞体积C.细胞凋亡（AnnexinV-FITC）D.细胞周期（Ki-67）

【参考答案】B

【详细解析】细胞体积反映细胞大小，与活性无关。膜完整性（7-Aminomethylcoumarin）通过检测膜电位评估存活率，AnnexinV-FITC识别凋亡标志物，Ki-67检测增殖活性。本题考察分选标准的区分能力。

【题干6】流式细胞仪在检测细胞表面抗原时，若使用CD3和CD8双标记，哪种荧光染料组合最合适？

【选项】A.PE-FITC/APC-PE-Cy5B.PE/APC-Cy7C.PE-Cy5/APC-FITCD.PE/APC

【参考答案】B

【详细解析】CD3和CD8均为单次免疫球蛋白结构，需采用不同荧光通道避免同型抗体交叉反应。PE（绿）和Cy7（红）光谱差异大（间隔≥50nm），而FITC与PE光谱重叠（间隔仅15nm）。本题考察双标记荧光染料的合理选择。

【题干7】流式细胞仪分析中，出现“鬼峰”（FalsePositive）最常见的原因是？

【选项】A.样本浓度过高B.激光功率不足C.荧光淬灭未校正D.胞外标记物脱落

【参考答案】C

【详细解析】荧光淬灭指染料在非靶细胞或背景中自发荧光或内源性荧光，未通过补偿矩阵校正会导致鬼峰。选项A导致信号饱和但不会产生假阳性，D属于样本制备问题。本题测试数据分析基础。

【题干8】流式细胞仪检测细胞周期时，G1/S期边界最常用的标志物是？

【选项】A.Ki-67B.Cdc25C.p53D.CyclinE

【参考答案】A

【详细解析】Ki-67是增殖相关蛋白，仅表达于S/G2期，能明确区分G1/S期转折点。Cdc25（激酶）参与G2/M转换，p53是调控蛋白，CyclinE触发G1/S期转换。本题考察细胞周期检测核心指标。

【题干9】流式细胞仪在检测凋亡细胞时，AnnexinV-FITC与PI双染法的标准流程是？

【选项】A.先标记PI后AnnexinVB.同步标记两者后4℃孵育30minC.PI染色需避光D.AnnexinV标记后固定

【参考答案】C

【详细解析】PI（碘丙啶）需避光染色（因光敏性），AnnexinV-FITC与PI