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第1页,共37页,星期日,2025年,2月5日第十章紫外-可见分光光度法第一节概述第二节紫外-可见分光光度法的基本原理第三节紫外-可见分光光度计第四节定性和定量分析方法第2页,共37页,星期日,2025年,2月5日1.电磁辐射与电磁波谱、物质对光的选择性吸收等基础知识。2.紫外-可见分光光度法的基本原理。3.紫外-可见分光光度计的主要部件、仪器类型、测量条件的选择。4.定性和定量分析方法。学习要点第3页,共37页,星期日,2025年,2月5日知识目标教学目标能力目标1、理解掌握朗伯-比尔定律的意义及应用。2、掌握紫外光谱定量分析的原理和方法。1、学会分光光度计的使用。2、初步学会对物质进行定性、定量分析。第4页,共37页,星期日,2025年,2月5日第一节光谱分析法概述一、电磁辐射与电磁波谱电磁辐射:是一种以电磁波的形式在空间不需任何物质作为传播媒介的高速传播的粒子流。它既具有波动性,又具有粒子性,即波粒二象性。(一)波动性光的波动性用波长λ、频率υ或波数σ等主要参数描述。(二)粒子性第5页,共37页,星期日,2025年,2月5日二、物质对光的选择性吸收单色光:单一波长的光复合光:由不同波长的光组合而成的光互补色光:把适当颜色的两种单色光按一定的强度比例混合,也可以成为白光。这两种单色光就称为互补色光白光青蓝青绿黄橙红紫蓝第6页,共37页,星期日,2025年,2月5日不同物质对各种波长光的吸收程度是不相等的,物质对于不同波长的光线吸收、透过、反射、折射的程度不同而使物质呈现出不同的颜色。如果物质选择性地吸收了某些波长的光,这种物质的颜色就由它所反射或透过光的颜色来决定,即物质呈现的颜色是其吸收光颜色的互补色。光的选择性吸收第7页,共37页,星期日,2025年,2月5日光学分析法非光谱法光谱分析法折射法旋光法比浊法衍射法发射光谱法散射光谱法吸收光谱法测定电磁辐射的反射、折射、干涉、衍射和偏振等基本性质变化的分析方法。γ射线、X荧光、原子发射、原子荧光、分子荧光瑞利散射和拉曼散射可见、紫外、红外分光光度法三、光谱分析法的分类第8页,共37页,星期日,2025年,2月5日紫外-可见分光光度法(UV-Vis):研究物质在紫外(200-400nm)-可见光(400-760nm)区分子吸收光谱的分析方法。特点:1.灵敏度高2.精密度和准确度较高3.仪器设备简单4.选择性较好5.应用范围广光谱分析法分类第9页,共37页,星期日,2025年,2月5日(一)透光率与吸光度当一束平行单色光照射到任何均匀、非散射的介质(固体、液体或气体),例如溶液时,光的一部分被介质吸收,一部分透过溶液、一部分被器皿的表面反射。如果入射光的强度为I0,吸收光的强度为Ia,透过光的强度为It,反射光的强度为Ir则它们之间的关系为I0=Ir+Ia+It第二节基本原理一、朗伯-比尔定律第10页,共37页,星期日,2025年,2月5日在分光光度测定中,盛溶液的比色皿都是采用相同材质的光学玻璃制成的,反射光的强度基本上是不变的(一般约为入射光强度的4%)其影响可以互相抵消,于是可以简化为I0=It+Ia当入射光的强度I0一定时,如果Ia越大,It就越小,即透过光的强度越小。基本原理第11页,共37页,星期日,2025年,2月5日(二)朗伯-比尔定律1.朗伯定律A=K1L2.比耳定律A=K2c3.朗伯-比耳定律A=KcL朗伯-比尔定律:当一束平行的单色光通过均匀、无散射现象的某一含有吸光物质的溶液时,在入射光的波长、强度、溶液温度等条件不变的情况下,溶液的吸光度与溶液的浓度和液层厚度的乘积成正比。基本原理第12页,共37页,星期日,2025年,2月5日(三)吸光系数1.摩尔吸光系数当溶液浓度c的单位为mol/L,液层厚度的单位为cm时,K称为摩尔吸光系数,用ε表示,单位为L/(mol·cm)2.百分吸光系数当c的单位为g/100ml,L的单位为cm时,K用表示,称为吸光系数,其单位为单位为ml/(g·cm)。与ε间的关
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