第19章色谱法分离原理1.pptVIP

4）流速u

由vanDeemter方程H=A+B/u+C·u知道：??

以u对H作图，可得H-u曲线（如图），从该曲线得到：第31页，共44页，星期日，2025年，2月5日第32页，共44页，星期日，2025年，2月5日19.4分离度及色谱分离方程一、分离度(Resolution,R)同时反映色谱柱效能和选择性的一个综合指标。也称总分离效能指标或分辨率。其定义为：利用此式，可直接从色谱流出曲线上求出分离度R。R越大，相邻组分分离越好。当R=1.5时，分离程度可达99.7%，因此R=1.5通常用作是否分开的判据。第33页，共44页，星期日，2025年，2月5日第34页，共44页，星期日，2025年，2月5日二、色谱分离方程对于相邻的难分离组分，由于它们的分配系数K相差小，可合理假设k1≈k2=k，Y1≈Y2=Y。因此可导出R与n、a和k的关系：第35页，共44页，星期日，2025年，2月5日分离度R与选择因子α的关系α越大，柱选择性越好，对分离有利。α的微小变化可引起R较大改变。如，当α从1.01增加至1.10(增加9%)时，R则增加9倍(但α1.5,R增加不大)。改变α的方法有：降低柱温、改变流动相及固定相的性质和组成。分离度R分配比k的关系k增加，分离度R增加，但当k10，则R的增加不明显。通常k在2-10之间。改变k的方法有：适当增加柱温(GC)、改变流动相性质和组成(LC)以及固定相含量。第36页，共44页，星期日，2025年，2月5日19.5色谱定性和定量分析一、色谱定性鉴定方法1.利用纯物质定性的方法利用保留值定性：通过对比试样中具有与纯物质相同保留值的色谱峰，来确定试样中是否含有该物质及在色谱图中的位置。2.相对保留值定性利用相对保留值g21定性3.加入已知物增加峰高法利用加入法定性：将纯物质加入到试样中，观察各组分色谱峰的相对变化。第37页，共44页，星期日，2025年，2月5日4.保留指数又称柯瓦指数(Ⅰ)，是一种重现性较好的定性参数。测定方法：将正构烷烃作为标准，规定其保留指数为分子中碳原子个数乘以100（如正己烷的保留指数为600）。其它物质的保留指数（IX）是通过选定两个相邻的正构烷烃，其分别具有Z和Z＋1个碳原子。被测物质X的调整保留时间应在相邻两个正构烷烃的调整保留值之间如图所示：第38页，共44页，星期日，2025年，2月5日保留指数计算方法第39页，共44页，星期日，2025年，2月5日二、色谱定量分析方法1.峰面积的测量（1）峰高（h）乘半峰宽（Y1/2）法：近似将色谱峰当作等腰三角形。此法算出的面积是实际峰面积的0.94倍：A=1.065h·Y1/2（2）峰高乘平均峰宽法：当峰形不对称时，可在峰高0.15和0.85处分别测定峰宽，由下式计算峰面积：A=h·（Y0.15+Y0.85）/2第40页，共44页，星期日，2025年，2月5日2.定量校正因子绝对校正因子：相对校正因子：相对响应值3.常用的几种定量方法（1）归一化法：特点及要求：归一化法简便、准确；进样量的准确性和操作条件的变动对测定结果影响不大；仅适用于试样中所有组分全出峰的情况。%100%1?=?=niAisiAisiifAfAm第41页，共44页，星期日，2025年，2月5日（2）内标法内标物要满足以下要求：（a）试样中不含有该物质；（b）与被测组分性质比较接近；（c）不与试样发生化学反应；（d）出峰位置应位于被测组分附近，且无组分峰影响。第42页，共44页，星期日，2025年，2月5日（3）外标法外标法也称为标准曲线法。特点及要求：外标法不使用校正因子，准确性较高，操作条件变化对结果准确性影响较大。对进样量的准确性控制要求较高，适用于大批量试样的快速分析。第43页，共44页，星期日，2025年，2月5日例1已知物质A和B的分配系数K分别为6.50和6.31，已知相比为0.422。试计算：（1）两物质的分配比;（2）选择性系数；（3）欲得到分离度为1.5时需多少塔板数？（4）若柱长为806cm，流动相的流速为7.