ApoE修饰聚合物囊泡小分子抑制剂：原位胶质母细胞瘤治疗新突破.docxVIP

ApoE修饰聚合物囊泡小分子抑制剂：原位胶质母细胞瘤治疗新突破

一、引言

1.1研究背景与意义

胶质母细胞瘤（GlioblastomaMultiforme，GBM）作为中枢神经系统原发性肿瘤的一种，恶性程度被世界卫生组织（WHO）评定为Ⅳ级，是最致命的原发性脑肿瘤之一。据统计，患者自诊断后1年生存率仅为47％，总的中位生存期仅为12-14个月，给患者家庭和社会带来了沉重的负担。GBM的高致死率和高复发率主要归因于其高度浸润性生长方式，肿瘤细胞与正常脑组织边界模糊，手术难以彻底切除；同时，血脑屏障（Blood-BrainBarrier，BBB）的存在使得大多数治疗药物难以有效进入肿瘤部位发挥作用。

目前，临床上对于GBM的治疗主要采取手术切除、放疗和化疗等综合治疗手段。手术切除是治疗GBM的重要初始步骤，但由于肿瘤的浸润性生长，很难实现完全切除，残留的肿瘤细胞往往会导致肿瘤复发。放疗通过高能射线杀死肿瘤细胞，但在杀伤肿瘤细胞的同时，也会对周围正常脑组织造成一定的损伤，引发一系列不良反应，如放射性脑坏死、认知功能障碍等。化疗药物虽能在一定程度上抑制肿瘤细胞的生长，但由于血脑屏障的限制，多数化疗药物难以穿透血脑屏障，到达肿瘤部位的药物浓度较低，无法达到有效的治疗剂量；而且化疗药物通常缺乏肿瘤特异性，在全身循环过程中会对正常组织和器官产生较大的毒副作用，导致患者出现恶心、呕吐、脱发、骨髓抑制等不良反应，严重影响患者的生活质量和治疗依从性。

近年来，随着纳米技术的不断发展，纳米药物在GBM治疗领域展现出了巨大的潜力。纳米药物能够通过对其尺寸、表面性质和组成成分等进行精确调控，实现对肿瘤组织的被动靶向或主动靶向递送，从而提高药物在肿瘤部位的富集程度，降低药物对正常组织的毒副作用。同时，纳米药物还可以改善药物的药代动力学和药效学性质，提高药物的稳定性和生物利用度。小分子抑制剂作为一类具有明确靶点、优越安全性和肿瘤选择性的药物，被广泛应用于多种肿瘤的治疗。然而，与大部分化疗药物一样，小分子抑制剂在治疗GBM时也面临着血脑屏障穿透效率低、药物利用率不高的问题，难以直接用于GBM的治疗。

载脂蛋白E（ApolipoproteinE，ApoE）是一种在脂质代谢和神经生物学中发挥重要作用的蛋白质。ApoE能够与血脑屏障上的特定受体结合，介导细胞对其的摄取，从而穿过血脑屏障。基于此，利用ApoE修饰的聚合物囊泡作为载体来递送小分子抑制剂，有望解决小分子抑制剂难以穿透血脑屏障的问题，实现对原位GBM的安全高效治疗。本研究设计制备ApoE修饰的聚合物囊泡小分子抑制剂，具有重要的创新性和意义。一方面，通过ApoE修饰实现对血脑屏障的特异性识别和高效穿透，提高小分子抑制剂在肿瘤部位的浓度，增强治疗效果；另一方面，聚合物囊泡作为载体能够有效保护小分子抑制剂，改善其药代动力学性质，降低毒副作用，为GBM的治疗提供一种新的安全有效的策略，有望打破GBM治疗的瓶颈，提高患者的生存率和生活质量。

1.2研究目的与方法

本研究旨在设计并制备ApoE修饰的聚合物囊泡小分子抑制剂，以实现对原位胶质母细胞瘤的安全高效治疗，具体从以下几个方面开展研究。

在实验设计方面，构建了载脂蛋白E衍生肽修饰的靶向不对称聚碳酸酯囊泡（ApoE-CP），利用其装载小分子抑制剂Rigosertib（RGS）。通过合理的实验分组，设置对照组和实验组，对比观察ApoE-CP-RGS对原位胶质母细胞瘤的治疗效果。在对照组中，采用未修饰的聚合物囊泡装载RGS以及单纯使用RGS药物进行处理，以此来突出ApoE修饰和聚合物囊泡载体的作用。

材料选择上，制备ApoE-CP选用聚乙二醇-聚(三亚甲基碳酸酯-二硫戊环三亚甲基碳酸酯)-精胺（PEG-P(TMC-DTC)-spermine）和端ApoE聚乙二醇-聚(三亚甲基碳酸酯-二硫戊环三亚甲基碳酸酯)（ApoE-PEG-P(TMC-DTC)）为原料。这些材料具有良好的生物相容性和可降解性，其中PEG能够延长囊泡在血液循环中的时间，而五元环二硫戊环三亚甲基碳酸酯可通过自交联增强囊泡的稳定性。小分子抑制剂Rigosertib（RGS）是一种具有明确抗肿瘤靶点的药物，对胶质母细胞瘤细胞具有抑制作用，但由于血脑屏障的阻碍，其单独使用时治疗效果不佳，故选择将其作为被递送的药物。

在检测分析方法上，运用动态光散射（DLS）技术来测定ApoE-CP的粒径大小和分布情况，以确保囊泡制备的均一性和稳定性；采用透射电子显微镜（TEM）观察ApoE-CP的形态结构，直观