艾滋病实验室检测技术及职业暴露.pptVIP

三、职业暴露第62页，共85页，星期日，2025年，2月5日第63页，共85页，星期日，2025年，2月5日第64页，共85页，星期日，2025年，2月5日渗滤实验原理：双抗原夹心法样本:血浆/血清（若有过滤装置，则可测全血）可将抗原固定于不同位置，区分HIV-1和HIV-2实验需几步：加样本，加洗液，加信号试剂。一般在5-15min完成弱阳性结果较难判断+Y+YHIV抗原HIV特异性抗体金标HIV抗原显色第30页，共85页，星期日，2025年，2月5日免疫渗滤原理的产品构造示意图第31页，共85页，星期日，2025年，2月5日结果第32页，共85页，星期日，2025年，2月5日优点：快速、简便、易操作

可检测100份以内小批量样品需要很少的设备和试剂检测地点可扩展到实验室以外只需对技术人员做适当培训大部分为一步法在短时间(30分钟)内出结果结果易目测判读可在室温下保存第33页，共85页，星期日，2025年，2月5日缺点不宜一次检测100份以上的大批量样品比ELISA法价格略高。结果判读不客观，易受主观因素影响第34页，共85页，星期日，2025年，2月5日快速检测试剂选择1.必须使用经国家食品药品监督管理局注册批准的快速试剂；2.试剂必须在有效期内使用；3.根据检测目的，选择试剂初筛选择敏感性高的试剂，复检选择特异性高的试剂；4.推荐使用临床评估质量好并且近几年连续考评结果稳定的试剂。第35页，共85页，星期日，2025年，2月5日第36页，共85页，星期日，2025年，2月5日三代与四代比较（快速试剂）四代试剂不仅可以检测出血清/血浆/全血样本中的HIV-1和HIV-2抗体，还可以检测出p24抗原。p24抗原是感染HIV病毒后产生的一种蛋白质，比HIV抗体出现的要早，在艾滋病感染初期、窗口期内可以通过检测p24抗原来判断是否感染HIV。四代试剂比三代试剂平均提前5天可以检测出HIV感染者。灵敏度为92.31%，特异性为99.66%。目前国内尚未上市第37页，共85页，星期日，2025年，2月5日复核试验方法选择替代组合WB检测结果阳性一致率（%）＋－±EIA1+RT1＋35100100EIA1+RT2＋34900100RT1+EIA1＋35100100RT1+EIA2＋33800100RT1+RT2＋3575098.5EIA1+EIA2＋3341099.7第38页，共85页，星期日，2025年，2月5日免疫层析结果判读记录仪第39页，共85页，星期日，2025年，2月5日第40页，共85页，星期日，2025年，2月5日自动生成报告第41页，共85页，星期日，2025年，2月5日结果导出Excel第42页，共85页，星期日，2025年，2月5日第43页，共85页，星期日，2025年，2月5日免疫层析结果判读记录仪优点：1.检测结果的保存2.自动生成报告3.结果可导出缺点：1.不适合批量操作第44页，共85页，星期日，2025年，2月5日快速检测，是艾滋病实验室多了一种检测方法。快速检测，是为了更多、更快的的发现感染者。快速检测，不是为了取代实验室，但不能因为有了实验室而放弃使用快速检测。第45页，共85页，星期日，2025年，2月5日明胶颗粒凝集试验（PA）将提纯后的HIV抗原连接到有色明胶颗粒上，制成致敏颗粒。当加入的检测标本中有HIV抗体存在时，即可使致敏颗粒凝集，出现肉眼可见的浅色凝集环（斑）；而若标本中无HIV抗体，致敏颗粒即在重力作用下沉人U型板底，形成一个深色红点。第46页，共85页，星期日，2025年，2月5日1、加入样品稀释液孔号75μl25μl25μl13212、加入测试样品25μl孔号1321弃去3、样品倍比稀释孔号1321最终稀释倍数1：1625μl25μl25μl1：8第47页，共85页，星期日，2025年，2月5日5、混匀，加盖，室温2个小时6、结果判读致敏颗粒4、加入明胶颗粒最终稀释倍数孔号13211：32未致敏颗粒25μl25μl1：16第48页，共85页，星期日，2025年，2月5日第49页，共85页，星期日，2025年，2月5日优点：凝集试验具有操作简便，经一步即可迅速得出结果，不需任何仪器等优点该方法的敏感性及特异性与EL1SA方法相近不需特殊仪器该方法的敏感性及特异性与EL1SA方法相近溶血标本