第十五章RNA生物合成.pptVIP

五、转录过程（真核）真核生物的转录过程也可以分为起始、延伸和终止三个阶段。真核生物转录起始需要各种转录因子（TF）与顺式作用元件相互结合，同时蛋白质因子之间也要相互识别、结合。能直接、间接辨认和结合真核生物基因顺式作用元件的蛋白质，统称为反式作用因子，直接或间接结合RNA聚合酶的反式作用因子，则称为转录因子。第29页，共76页，星期日，2025年，2月5日参与RNA-polⅡ转录的TFⅡ*相应于RNA-polI、II、III的转录因子，分别称为TFI、TFII、TFIII。第30页，共76页，星期日，2025年，2月5日真核转录起始（动画）第31页，共76页，星期日，2025年，2月5日真核转录延长（动画）第32页，共76页，星期日，2025年，2月5日真核转录终止（动画）第33页，共76页，星期日，2025年，2月5日主要内容第一节、转录第二节、转录后的加工第二节、基因转录调控第34页，共76页，星期日，2025年，2月5日基因转录的直接产物初级转录产物（primarytranscripts），必须经过转录后加工（post-transcriptionalprocessing），才会转变为有功能的RNA，即成熟RNA分子。一系列的加工修饰包括：RNA链的裂解5?端与3?端的切除特殊结构的形成剪接（splicing）碱基修饰和糖苷键改变第35页，共76页，星期日，2025年，2月5日一、原核生物mRNA的加工mRNA通常没有转录后的加工过程。rRNA需经剪切和修饰加工。剪切：将初级转录产物剪成16S、23S和5S三个片段修饰：核糖2’-羟基的甲基化tRNA的加工方式也是剪切和修饰。剪切：切除多余的核苷酸序列修饰：甲基化和3’-端加CCA第36页，共76页，星期日，2025年，2月5日二、真核生物mRNA的加工真核生物的大多数基因都被插入序列（interveningsequence）即内含子（intron）所分隔而成为间断基因（interruptedgene）即外显子（exon）。内含子是真核细胞基因中的非编码序列，而外显子是指真核细胞基因中的编码序列。转录后需通过剪接反应去除非编码区（内含子）使编码区（外显子）成为连续序列。第37页，共76页，星期日，2025年，2月5日转录产物为hnRNA的真核基因结构示意图231转录起始点AATAAA切离加尾转录终止点修饰点外显子翻译起始点内含子顺式作用元件结构基因1223112非编码序列非编码序列5′3′转录hnRNA231非编码序列非编码序列5′3′加工mRNA第38页，共76页，星期日，2025年，2月5日二、真核生物mRNA的加工由hnRNA转变成mRNA的加工修饰过程包括：（1）5’端形成特殊的帽子结构；（2）在链的3’端切断一段序列并加上多聚腺苷酸（polyA）尾巴；（3）通过剪接除去由内含子转录来的序列。第39页，共76页，星期日，2025年，2月5日帽子结构示意图“帽子”结构“帽子”结构N7甲基鸟苷酸（m7GpppX）“帽子”结构“帽子”结构核糖的2’OH同样可以被甲基化第40页，共76页，星期日，2025年，2月5日帽子结构的生成过程5?pppGp…5?GpppGp…pppGppi鸟苷酸转移酶5?m7GpppGp…甲基转移酶SAM5?ppGp…磷酸酶Pi第41页，共76页，星期日，2025年，2月5日真核生物3’多聚腺苷酸生成过程第42页，共76页，星期日，2025年，2月5日加帽和加尾的意义加帽可以使mRNA免遭核酸酶的攻击；也能与帽结合蛋白质复合体(cap-bindingcomplexofprotein)结合，并参与mRNA和核糖体的结合，启动蛋白质的生物合成。加尾可以维持mRNA作为翻译模板的活性，以及增加mRNA本身的稳定性。第43页，共76页，星期日，2025年，2月5日RNA剪接 mRNA的前体（hnRNA）经过剪接体（spliceosome）加工处理，去除内含子，并将相邻外显子连接起来，形成有功能mRAN(成熟mRNA)，这一过程称为RNA剪接（RNAsplicing）。AB内含子外显子CDhnRNAABCD内含子（snRNA）mRNA第44页，共76页，星期日，2025年，2月5日剪接过程内含子外显子1外显子2hnRNA中间产物成熟mRNA降解第一次转酯反应第二次转酯反应第45页