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（5）磷屏成像：用可重复使用的磷屏作为成像板专门的读出装置。第31页，共69页，星期日，2025年，2月5日计算机磷屏成像系统第32页，共69页，星期日，2025年，2月5日优点：可用于多种核素的宏观自显影操作简便不需胶片和显影定影等照相处理步骤磷屏可以重复使用缺点：分辨率较低目前还不能用于高倍光镜和电镜自显影仪器价格比较昂贵第33页，共69页，星期日，2025年，2月5日（二）放射自显影中常用的放射性核素应考虑其射线的种类、能量和半衰期。3H、14C、35S、45Ca、32P、33P、131I、125I、99mTc等。发射?射线的核素毒性都较大，一般不用于示踪研究。单纯的发射?射线的放射性核素，难于在乳胶中形成潜影，自显影效果差。第34页，共69页，星期日，2025年，2月5日核素半衰期β-粒子最大的能量（MeV）β-粒子平均能量（MeV）3H14C32P35S45Ca59Fe89Sr125I131I12.33年5730年14.28天87.4天165天44.6天50.5天60.2天8.04天0.01880.1551.710.1670.2580.461（51%）0.269（47%）1.488——0.6070.0050.050.6950.0550.100.120.570.0037内0.0227俄0.205放射自显影常用的放射性核素第35页，共69页，星期日，2025年，2月5日四放射自显影的基本技术和方法（一）主要类型：宏观自显影：整体水平光镜自显影：细胞水平电镜自显影：亚细胞水平第36页，共69页，星期日，2025年，2月5日1、宏观自显影：常用肉眼、放大镜或低倍显微镜观察用灰度或黑度对比来判断示踪剂的部位和数量优点是可以同时观察各脏器、组织中放射性示踪剂的分布，多用于小动物的整体标本，大动物的脏器或肢体，以及各种电泳谱、色谱和免疫沉淀板等的示踪研究。第37页，共69页，星期日，2025年，2月5日第38页，共69页，星期日，2025年，2月5日第39页，共69页，星期日，2025年，2月5日小鼠头部的宏观自显影第40页，共69页，星期日，2025年，2月5日凝胶电泳的自显影结果第41页，共69页，星期日，2025年，2月5日核酸电泳展开板的放射自显影第42页，共69页，星期日，2025年，2月5日2、光镜自显影：以光学显微镜为工具进行观察，以镜下的银颗粒分布及数量来判断放射性核素示踪剂的部位和数量。镜下的银颗粒为黑色或深棕色的小圆点适用于冰冻组织切片、石蜡组织切片，血细胞涂片、骨髓细胞涂片等标本的示踪研究。第43页，共69页，星期日，2025年，2月5日第44页，共69页，星期日，2025年，2月5日放射自显影检测寄生虫感染中的脾细胞第45页，共69页，星期日，2025年，2月5日3、电镜自显影：以电子显微镜观察，以电镜下银颗粒的分布及数量来判断。电镜下电子轨迹为蛇样扭曲适用于细胞超微结构上的精确定位和定量第46页，共69页，星期日，2025年，2月5日第47页，共69页，星期日，2025年，2月5日蛇毒素与乙酰胆碱受体结合第48页，共69页，星期日，2025年，2月5日（二）基本方法1、基本步骤：?示踪：向实验动物体内或离体标本上引入放射性核素标记物。?标本制备：取生物标本并制备成含放射性核素的切片、涂片?自显影制备：暗室中在制备的标本上敷加感光材料。?曝射：避光条件下核射线作用于感光乳胶。?照相处理：显影、定影、水洗、干燥、染色、封固。⑥阅读分析。第49页，共69页，星期日，2025年，2月5日第1页，共69页，星期日，2025年，2月5日本章重点：放射自显影的定义放射自显影的基本类型和基本方法放射自显影的感光材料第2页，共69页，星期日，2025年，2月5日一概述1、定义：放射自显影:利用射线使感光材料感光形成潜影，经显影定影后形成图像；判断放射性示踪剂的分布部位和数量（半定量）的技术。第3页，共69页，星期日，2025年，2月5日第4页，共69页，星期日，2025年，2月5日2、放射自显影的发展1867年:铀盐可以使银离子感光；1924年Lacassagne应用于研究钚在生物标本中的分布1946年，Belanger和Leblond首次建立现代放射自显影的方法。第5页，共69页，星期日，2025年，2月5日3、放射自显影的优点1）灵敏度高。2）定位准确，能把定位和定量结合分析