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初代培养:芽、茎段、叶片、花器等外植体在离体培养条件下诱导愈伤组织、侧芽或不定芽、胚状体过程。第六十一页,共八十七页。继代培养:更换新鲜培养基来繁殖同种类型的材料(愈伤组织、芽)。第六十二页,共八十七页。生根培养:将芽苗转接到生根培养基上培养成为完整植株的过程。第六十三页,共八十七页。初代培养继代培养生根培养驯化移栽植物组织培养一般过程第六十四页,共八十七页。思考:
各种组织培养类型有何主要的异同处?
★相同点:无菌操作人工培养基上培养★不同点:外植体不同成苗途径与培养方法不同
第六十五页,共八十七页。三、植物组织培养的特点第六十六页,共八十七页。1、培养材料经济第六十七页,共八十七页。2、培养条件人为控制,周年生产第六十八页,共八十七页。3、生长周期短,繁殖率高第六十九页,共八十七页。4、管理方便,有利于实现工厂化生产和自动化控制第七十页,共八十七页。(二)植物组织培养的基本理论1.细胞全能性理论2.植物的再生性3.根芽激素理论4.组培苗的遗传稳定性第七十一页,共八十七页。1细胞全能性理论植物每一个具有完整细胞核的体细胞,都含有植物体的全部遗传信息,在适当条件下,具有发育成完整植株的潜在能力。第七十二页,共八十七页。②创造理想的适于细胞生长和分化的环境植物细胞全能性表达的条件①体细胞与完整植株分离,脱离完整植株的控制第七十三页,共八十七页。细胞全能性的实现与利用第七十四页,共八十七页。①直接分生芽②形成愈伤组织,再分化形成芽③形成胚状体,由胚状体直接重建完整植株,或制成人工种子后再重建植株。实现细胞全能性的途径:34第七十五页,共八十七页。第七十六页,共八十七页。2植物的再生性
现象:伤口愈合扦插生根
植株再生的过程即为植物细胞全能性表达的过程,经过脱分化和再分化两个阶段。第七十七页,共八十七页。液氮罐(用于冻存培养的动物细胞)第二十九页,共八十七页。二细胞培养的基本技术
——无菌操作细胞工程的所有试验都要求在无菌条件下进行,要求十分严格的无菌操作。1、准备室、接种室、培养室(紫外线、熏蒸等);2、超净工作台、高压灭菌设备、过滤器;3、生物材料的消毒(酒精、升汞、次氯酸钠等);4、试验器械、器皿的灭菌(干热、湿热);5、药品、培养基的灭菌(湿热、过滤);第三十页,共八十七页。——细胞培养技术细胞培养是指动物、植物或微生物细胞在体外无菌条件下的保存和生长。(微生物培养、植物细胞培养、动物细胞培养)基本步骤包括:获取原材料及除菌;配制培养基,对培养基进行灭菌;接种、培养和传代。第三十一页,共八十七页。——细胞融合技术离体条件下将不同生物或同种生物不同类型的单细胞通过无性方式融合成一个杂合细胞的技术。——单克隆抗体细胞融合技术的主要过程:制备原生质体(植物);诱导细胞融合(化学融合剂介导、电融合、病毒融合剂介导等);筛选杂合细胞。第三十二页,共八十七页。第三十三页,共八十七页。植物细胞工程植物组织培养细胞培养体细胞胚发生单倍体培养合子胚培养原生质体培养与细胞融合快速繁殖技术植物脱毒技术次生物质与植物细胞的大量培养人工种子第三十四页,共八十七页。思考:植物有哪些繁殖方法?第三十五页,共八十七页。分株繁殖压条繁殖播种繁殖嫁接繁殖第三十六页,共八十七页。扦插繁殖组织培养繁殖第三十七页,共八十七页。第一节植物组织培养(tissueculture)技术第三十八页,共八十七页。一、植物组织培养的含义(重点)
二、植物组织培养的类型(难点)
三、植物组织培养的特点(重点)
(一)植物组培的含义、类型与特点第三十九页,共八十七页。什么是植物组织培养??指在无菌条件下,将离体的植物器官、组织、细胞或原生质体,培养在人工配制的培养基上,人为控制培养条件,使其生长、分化、增殖,发育成完整植株或生产次生代谢物质的过程和技术。第四十页,共八十七页。组织培养----离体培养组织培养----无菌培养第四十一页,共八十七页。组织培养----植物克隆第四十二页,共八十七页。广义和狭义概念有何区别?★组培范围不同,即外植体范围不同。广义组培狭义组培第四十三页,共八十七页。外植体〔explant〕:
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