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熔解温度试题及答案高中

单项选择题（每题2分，共10题）

1.DNA的熔解温度（Tm）是指（）

A.A260达到最大值时的温度

B.A260达到最大值50%时的温度

C.A280达到最大值时的温度

D.A280达到最大值50%时的温度

答案：B

解析：DNA的熔解温度是指核酸在加热变性过程中，紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度。DNA变性时，260nm处紫外吸收增加，A260达到最大值50%时的温度就是Tm。

2.以下因素中，使DNA熔解温度升高的是（）

A.G-C含量增加

B.A-T含量增加

C.溶液离子强度降低

D.DNA长度变短

答案：A

解析：G-C之间是三个氢键，A-T之间是两个氢键，G-C含量增加，DNA双链稳定性增强，熔解温度升高。溶液离子强度降低、DNA长度变短会使Tm降低，A-T含量增加也会使Tm降低。

3.测定DNA熔解温度的常用方法是（）

A.荧光定量法

B.紫外分光光度法

C.凝胶电泳法

D.离心法

答案：B

解析：DNA变性时，在260nm处紫外吸收值会发生变化，利用紫外分光光度法可监测A260的变化，从而确定DNA的熔解温度。荧光定量法主要用于核酸定量；凝胶电泳法用于分离核酸；离心法用于物质分离等，都不是测定Tm的常用方法。

4.一段DNA序列为5-ATGCTAGC-3，其互补链序列为3-TACGATCG-5，该DNA的Tm与下列哪种情况有关（）

A.仅与5-ATGCTAGC-3有关

B.仅与3-TACGATCG-5有关

C.与两条链都有关

D.与两条链都无关

答案：C

解析：DNA的熔解温度是双链DNA变性的温度，其与整个双链结构相关，所以与两条互补链都有关系。

5.DNA熔解温度的高低取决于（）

A.碱基组成和序列长度

B.磷酸二酯键的数目

C.核酸的电荷数

D.溶液的酸碱度

答案：A

解析：碱基组成中G-C含量越高、序列长度越长，DNA双链稳定性越高，熔解温度越高。磷酸二酯键的数目主要影响核酸的化学结构稳定性；核酸电荷数和溶液酸碱度对Tm有一定影响，但不是决定Tm高低的主要因素。

6.关于DNA熔解温度，说法错误的是（）

A.不同来源DNA的Tm不同

B.Tm是固定不变的值

C.离子强度影响Tm

D.加热速度会影响Tm测定

答案：B

解析：不同来源DNA碱基组成不同，Tm不同；离子强度、加热速度等因素都会影响Tm的测定，Tm不是一个固定不变的值，它会受多种因素影响而改变。

7.当DNA溶液温度达到熔解温度时，会发生（）

A.磷酸二酯键断裂

B.氢键断裂

C.糖苷键断裂

D.肽键断裂

答案：B

解析：DNA熔解是双链解链的过程，主要是双链间的氢键断裂，磷酸二酯键、糖苷键在一般的熔解温度下不断裂，肽键存在于蛋白质中，与DNA熔解无关。

8.双链DNA中，若A+T占碱基总数的60%，其熔解温度（）

A.较高

B.较低

C.不变

D.无法判断

答案：B

解析：A+T占碱基总数60%，则G+C占40%，A-T之间是两个氢键，G-C之间是三个氢键，G-C含量低，双链稳定性差，熔解温度较低。

9.下列哪种物质不会影响DNA的熔解温度（）

A.尿素

B.盐离子

C.蛋白质

D.水

答案：D

解析：尿素可以破坏氢键，影响DNA双链稳定性从而影响Tm；盐离子浓度会影响DNA双链的电荷环境，影响Tm；一些蛋白质可以与DNA结合影响其结构，影响Tm；水是DNA存在的溶剂，一般不会直接影响DNA的熔解温度。

10.提高DNA熔解温度的方法不包括（）

A.增加G-C含量

B.适当提高盐离子浓度

C.降低加热速度

D.增加A-T含量

答案：D

解析：增加G-C含量可增强双链稳定性提高Tm；适当提高盐离子浓度可稳定DNA双链提高Tm；降低加热速度使变性过程更充分，能较准确测定Tm。而增加A-T含量会降低双链稳定性，降低Tm。

多项选择题（每题2分，共10题）

1.影响DNA熔解温度的因素有（）

A.碱基组成

B.序列长度

C.溶液离子强度

D.加热速度

答案：ABCD

解析：碱基组成中G-C含量影响双链稳定性进而影响Tm；序列长度越长Tm越高；溶液离子强度影响DNA双链的电荷环境，影响Tm；加热速度不同，DNA变性过程不同，会影响Tm的测定。

2.以下关于DNA熔