高中生物同步基因工程的基本操作程序.pptxVIP

1．2基因工程的基本操作程序;课程原则

概述基因工程的基本操作程序。

课标解读

1.通过比较、分析，掌握目的基因获取的常见办法。

2.理解目的基因导入受体细胞的具体过程。

3.结合基因的体现过程，掌握目的基因检测与鉴定的具体操作。;

1．基因工程的基本操作程序

(1)的获取。

(2)的构建。

(3)将目的基因导入。

(4)目的基因的。;2．目的基因的获取

(1)目的基因：重要是指的基因，也能够是某些含有的因子。

(2)常见办法：

①从基因文库中获取

基因文库的种类;②运用PCR技术扩增目的基因

a．原理：。

b．条件：、DNA模板、、四种脱氧核苷酸。

c．过程：目的基因DNA受热变性后解链为单链，与单链对应互补序列结合，然后在作用下进行延伸，如此重复循环多次。

d．成果：每一次循环后，目的基因的量能够，即成指数形式扩增(约为2n，n为扩增循环的次数)。

③人工合成法：如基因比较小，又已知，可借助用化学办法直接人工合成。;[思维激活1]PCR过程中，需要解旋酶吗？所需要的DNA聚合酶应含有什么特点？

提示PCR过程中，DNA双链解开是在高温下完毕的，不需要解旋酶；由于PCR过程温度较高，因此需要能耐高温的DNA聚合酶。;1．提取目的基因办法的比较;过

程;优点;2．PCR技术与DNA复制的比较;联系;特别提示(1)真核细胞的基因编码区含有不能体现的内含子，因此，不能直接用于基因的扩增和体现。获得真核细胞中目的基因时，普通用人工合成的办法。

(2)PCR扩增的过程：目的基因DNA受热变性后解链为单链，引物与单链对应的互补序列结合，然后在DNA聚合酶作用下进行延伸，如此重复循环多次。由于延伸后得到的产物同样能够和引物结合，因而每一次循环后目的基因的量能够增加一培，即成指数形式扩增(约为2n，其中n为扩增循环的次数)。;【巩固1】下列获取目的基因的办法中需要模板链的是

()。

①从基因文库中获取目的基因②运用PCR技术扩增目的基因③反转录法④通过DNA合成仪运用化学办法人工合成

A．①②③④ B．①②③

C．①②④ D．②③;解析PCR运用的是DNA双链复制原理，即将双链DNA之间的氢键打开，变成单链DNA，作为聚合反映的模板。反转录法则是以目的基因转录成的信使RNA为模板，在逆转录酶的作用下，先反转录形成互补的单链DNA，再合成双链的DNA。①、④则均不需要模板。

答案D;1．基因体现载体的构建

(1)基因体现载体的构成

①启动子

位置：基因的首端。

功效：是识别和

结合的部位，驱动基因转录出。;②终止子

位置：基因的尾端。

功效：使在所需要的地方停止下来。

③标记基因：鉴别受体细胞中与否含有。

(2)基因体现载体的功效

使目的基因在受体细胞中，并且能够遗传给下一代，使目的基因能够和发挥作用。

(3)基因体现载体的构建

普通用同一种限制酶分别切割载体和目的基因，再用DNA连接酶把两者连接。;2．将目的基因导入受体细胞

(1)转化的概念

目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内 的过程。

(2)将目的基因导入植物细胞

①法：将目的基因导入双子叶植物和祼子植物。

②法：将目的基因导入单子叶植物惯用的办法。

③法：我国科学家独创的一种办法。;(3)将目的基因导入动物细胞

办法：法。

惯用受体细胞：