临床实验室检测和体外诊断系统 感染性疾病相关酵母样真菌抗微生物药物的体外活性检测微量肉汤稀释参考方法.pdfVIP

临床实验室检测和体外诊断系统感染性疾病相关酵母样真菌抗微生物药物

的体外活性检测微量肉汤稀释参考方法

警告-使用本文件可能涉及危险性材料、操作和设备。本文件无意陈述使用本文件所涉及的所有安全问

题。使用本文件前，使用者有责任建立适当的安全和健康措施并确定法规限制的适用性。

1范围

本文件描述了检测酵母样真菌抗真菌药物的敏感性的方法，包括引起感染的念珠菌属和新型隐球

菌。这里描述的参考方法尚未用于双相型真菌的酵母相菌研究，如皮炎芽生菌和/或荚膜组织胞浆菌荚

膜变种。另外在检测丝状真菌（霉菌）标准化中涉及几个未在当前程序阐述的其他问题。这些方法不在

本文件范围内。

本文件描述的微量肉汤稀释参考法可通过两种途径之一实现。一种途径通过肉眼确定MIC(CLSI方

法)[1][5];第二种途径通过光度法确定MIC(EUCAST方法)[2][10]。MIC反映了在规定试验条件下药物的

活性，并在考虑到其它因素下可对临床管理目的进行解释，如药物的药理学或抗真菌耐药机制。另外

MIC分布可用于确定野生型或非野生型真菌群落。MIC值的临床解释不在本文件的范围。对应于CLSI

方法和EUCAST衍生方法的解释性分类折点可查询相应机构提供的最新解释表[5][15]。推荐常规敏感性

试验方法或诊断检验器械与此参考方法进行比较，以保证验证或注册时结果的可比性和可靠性。

2规范性引用文件

本文件中没有规范性引用文件。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

ISO和IEC维护的用于标准化工作的术语数据库如下：

—ISO在线浏览平台

—IEC电子百科

3.1

抗真菌药物antifungalagent

指一类可以抑制或杀死真菌，可用于抗感染治疗的生物来源的、半合成的或合成的物质。

注：消毒剂、灭菌剂和防腐剂不在此定义范围内。

3.2抗真菌药物-属性

3.2.1

效价potency

指受试物活性部分所占比例，通过生物分析方法与相同物质的参考品比较而确定。

注：效价可表达为受试物中组分以毫克每克（mg/g）的质量分数、或以国际单位每克（IU/g）的活性含量、或以体

积分数或质量分数的百分含量或摩尔数每升的物质的量浓度。

3.2.2

浓度concentration

1

抗真菌药物（3.1）在规定体积液体中的量。

注1：该浓度以毫克/升（mg/L）来表示。

注2：虽然mg/L＝μg/mL，但不推荐使用μg/mL作为单位。

3.3

原液stocksolutions

用于进一步稀释的初始溶液。

3.4

最低抑菌浓度minimuminhibitoryconcentration

MIC

在规定的体外试验条件下、规定的时间内，能降低一定数量生长的最低浓度（3.2.2）。

注：最低抑菌浓度（MIC）以mg/L表达。

3.5

野生型wildtype

给定真菌菌株对某抗真菌药物（3.1）没有表型可检测到的获得性耐药机制。

3.6

参考菌株referencestrains

有特定分类编号，具有稳定、确定的抗真菌药物敏感性表型和/或基因型的特征明确的真菌菌株。

注：参考菌株是从菌种保藏机构获得并用于质量控制，其通常以贮存培养物的形式进行保存，试验所用工作培养物

来源于此。

3.7敏感性试验方法

3.7.1

肉汤稀释法brothdilution

是一种容器中加入适当体积抗真菌（3.1）溶液，该抗真菌药物浓度（3.2.2）采用递增（通常两倍）

增加，再加入适当体积的含一定接种量（3.9）菌液肉汤（3.8）的技术。

注：该方法的目的是确定最低抑菌浓度（3.4）。

3.7.2

微量肉汤稀释法brothmicro-dilution

指在微量稀释板中进行的肉汤稀释（3.7.1）试验，每孔体积不超过300μL。

注：微量肉汤稀释法也称为肉汤微量稀释法。

3.8

肉汤broth

用于酵母样真菌体外生长的液体培养基。

3.9

接种量inoculum