交泰丸入脑成分通过PTEN_AKT_NF-κB通路抑制LPS诱导BV2细胞炎症的机制研究.docxVIP

·614·中国医院药学杂志2025年3月第45卷第6期ChinJHospPharm，Mar2025，Vol45，No.6

交泰丸入脑成分通过PTEN/AKT/NF-κB通路抑制LPS诱导BV2细胞炎症的机制研究

陈佩瑶，戴国梁，王艳军，黄茜，王一然，邵雪文，居文政（南京中医药大学附属医院/江苏省中医院临床药理科，

江苏南京210029）

［摘要］目的：基于超高效液相色谱与四极杆-静电场轨道阱-线性离子阱三合一式质谱仪（UHPLC-Orbitrap-MS）、分子对接及分子生物学技术探讨交泰丸入脑成分抑制小鼠小胶质细胞（BV2）炎症的作用机制。方法：采用UHPLC-Orbitrap-MS技术分析交泰丸入脑成分，并结合分子对接技术筛选关键入脑成分。进一步构建脂多糖（lipopolysaccharides，LPS）诱导的BV2细胞炎症模型，并给予小檗碱（berberine，BBR）、木兰花碱（magnoflorine，MAG）干预处理。采用RT（q）-PCR检测细胞内肿瘤坏死因子-α（tumornecrosisfactor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β（interlenkin-1β,IL-1β)、IL-6mRNA表达水平并使用ELISA检测细胞上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白水平；倒置显微镜观察各组细胞形态；Westernblot检测各组细胞PTEN/AKT/NF-κB通路关键蛋白的表达。结果：鉴定出交泰丸入脑成分13个，均为生物碱类化合物。RT-PCR、ELISA结果显示，BBR、MAG均能显著降低BV2细胞炎症模型中TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA及蛋白表达水平。同时，BBR与MAG能改善BV2细胞炎症模型的细胞形态。此外，与正常组相比，模型组中p-PTEN/PTEN、p-AKT/AKT、p-p65/p65蛋白水平显著提高，而BBR、MAG组中上述蛋白的表达均得到显著抑制。结论：交泰丸入脑成分BBR、MAG可能通过抑制PTEN/AKT/NF-κB信号通路，进而抑制细胞炎性因子的表达并改善细胞形态，发挥抑制BV2细胞炎症的作用。

［关键词］交泰丸；超高效液相色谱与四极杆-静电场轨道阱-线性离子阱三合一式质谱仪；BV2细胞；炎症反应；第10号染色体磷酸酶和张力蛋白同源物

［中图分类号］R282；R966［文献标识码］A［文章编号］1001-5213（2025）06-0614-08DOI：10.13286/j.1001-5213.2025.06.02

Brain-penetratingcomponentsofJiaotaiPillsinhibitLPS-inducedinflammationinBV2cellsviathePTEN/AKT/NF-κBsignalingpathway

CHENPeiyao，DAIGuoliang，WANGYanjun，HUANGQian，WANGYiran，SHAOXuewen，JUWen-zheng（DepartmentofClinicalPharmacology，JiangsuProvinceHospitalofChineseMedicine，AffiliatedHospitalofNanjingUniversityofChineseMedicine，JiangsuNanjing210029，China）

ABSTRACT:OBJECTIVEToinvestigatethepotentialofbrain-penetratingcomponentsofJiaotaiPillsininhibitingtheinflam-mationinmousemicroglialcellsBV2viaultra-high-performanceliquidchromatographycombinedwithanOrbitrapmassspectrom-eter（UHPLC-OrbitrapMS），moleculardocking，andmolecularbiology.METHODSUHPLC-Orbitrap-MSwasusedtoana- lyzethebrain-penetratingc