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- 2025-09-03 发布于江苏
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·378·中国医院药学杂志2025年2月第45卷第4期ChinJHospPharm,Feb2025,Vol45,No.4
芍药甘草汤调控血浆外泌体miR-125b-5p对炎性因子及脊髓损伤后肌痉挛的影响
谢艳,吴晓龙,周英杰,柴旭斌,禚汉杰,邢伟鹏,黄勇(河南省洛阳正骨医院/河南省骨科医院生物医学工程研究室,河南洛阳471002)
[摘要]目的:探讨芍药甘草汤调控血浆外泌体中微小核糖核酸125b-5p(miR-125b-5p)抑制炎性因子白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素16(IL-16)表达对脊髓损伤(spinalcordinjury,SCI)后肌痉挛大鼠的干预作用及作用机制。方法:(1)提取芍药甘草汤有效成分,并进行成分测定。(2)将65只SD大鼠造SCI模型,并将造模成功的大鼠随机分为模型对照组、用药组、阳性对照组,每组15只。以上各组分别给予纯化水、芍药甘草汤和巴氯芬水溶液灌胃,并于灌胃14d时行BBB评分。模型对照组和用药组提取血浆外泌体并鉴定,确定其中可以调控IL-6、IL-16的miRNA,并进行实时荧光定量聚合酶链式反应(real-timequantitativepolymerasechainreaction,RT-qPCR)验证。(3)双荧光素酶报告基因实验验证筛选的miRNA与IL-6、IL-16的调控关系,培养SCI神经细胞并鉴定,同时药物处理及过表达和沉默miR-125b-5p,观察对IL-6、IL-16表达的影响。(4)大鼠活体给药及沉默或过表达miRNA再次行蛋白印迹(Westernblot)检测IL-6、IL-16表达。结果:(1)鉴定了53个有效成分,甘草酸和芍药苷含量最高。(2)BBB评分说明SCI大鼠功能出现障碍,但经巴氯芬和芍药甘草汤灌胃后,功能均得到恢复;Westernblot结果提示模型对照组IL-6、IL-16表达升高;血浆外泌体电镜下形态及标志性蛋白检测均为阳性;筛选的miR-125b-5p与IL-6、IL-16存在调控关系;且该miRNA在用药组呈现高表达。(3)双荧光素酶报告基因实验证实miR-125b-5p可以直接调控IL-6、IL-16的表达。
(4)培养神经细胞及活体给药均证明药物可以提高血浆外泌体中miR-125b-5p表达,抑制SCI后脊髓内IL-6、IL-16的表达。结论:芍药甘草汤可能通过提高血浆外泌体中miR-125b-5p的表达抑制IL-6、IL-16的表达,从而对SCI表现积极的干预作用。[关键词]脊髓损伤;外泌体;miR-125b-5p;炎性因子;芍药甘草汤
[中图分类号]R965[文献标识码]A[文章编号]1001-5213(2025)04-0378-09DOI:10.13286/j.1001-5213.2025.04.03
EffectsofShaoyaoGancaoDecoctiononinflammatoryfactorsandspasticityafterspinalcordinjuryviaregulatingtheplasmaexosomalmiR-125b-5p
XIEYan,WUXiaolong,ZHOUYingjie,CHAIXubin,ZHUOHanjie,XINGWeipeng,HUANGYong(BiomedicalEngineeringResearchLaboratory,LuoyangOrthopedic-TraumatologicalHospitalofHenanProvince,HenanPro-vincialOrthopedicHospital,HenanLuoyang471002,China)
ABSTRACT:OBJECTIVEToinvestigatetheinterventioneffectandmechanismofShaoyaoGancaoDecoction(SGD)onratswithmusclespasmafterspinalcordinjury(SCI)byregulatingplasmaexosomalmiR-125b-5pandinhibitingtheexpressionsofinflammatoryfactorsinterleukin6(IL-6)an
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