Chemerin在运动调控肥胖小鼠骨骼肌质量中的作用及机制.pdfVIP

中文摘要

研究目的

大量研究已证实，肥胖的患者和大小鼠，其血清和组织chemerin水平显著

升高、且升高程度与疾病严重程度和糖脂代谢紊乱程度正相关，运动减轻肥胖

和肥胖相关疾病的作用也与chemerin的减少密切相关。我们前期研究利用

chemerin全敲小鼠证实了chemerin对安静和运动的肥胖小鼠血糖血脂紊乱的改

善作用，且该作用与chemerin调控外周代谢器官如肝、骨骼肌、脂肪组织的糖

脂代谢以及胰岛细胞分泌功能密切相关。但chemerin调控血糖血脂的机制仍未

完全阐明。

作为人体最大的代谢器官，骨骼肌在糖脂代谢中发挥重要作用。近年来的

研究表明，骨骼肌质量下降和功能减弱可影响糖的摄取和利用、胰岛素敏感性

以及脂肪的氧化过程，从而导致糖脂代谢紊乱。骨骼肌质量减少的患者通常存

在糖脂代谢异常。糖脂代谢紊乱的肥胖患者，其骨骼肌质量也显著减少，而运

动对肥胖症的减脂作用不仅在于消耗脂肪，也与增加骨骼肌质量、进而提高代

谢率有关。但chemerin对安静和运动的肥胖小鼠骨骼肌质量是否有影响，以及

对骨骼肌质量的影响是否是chemerin调控糖脂代谢的机制之一，目前相关的研

究报道很少。

不仅肌肉质量，不同类型肌纤维也会影响骨骼肌对糖脂的利用。骨骼肌可

分为快肌、慢肌和中间态肌肉，快肌如胫骨前肌、股四头肌主要进行糖酵解，

慢肌如比目鱼肌主要进行糖和脂肪的有氧氧化，而中间态肌如腓肠肌介于两者

之间，既可以糖酵解、也可以有氧氧化。

因此，本文首先研究chemerin全敲对安静和运动的正常和肥胖小鼠上述快

肌、慢肌和中间态肌的骨骼肌质量的影响，并探究其与血糖血脂水平的关系；

进而，研究chemerin全敲调控骨骼肌质量的机制是否与其影响骨骼肌蛋白合成

有关（PI3K-Akt-mTOR通路是否激活）。该研究对深入理解chemerin的多种生

物学功能，尤其是chemerin对骨骼肌质量的调控作用及其对糖脂代谢的影响具

有重要作用，并为肥胖和肌少症的防治提供新靶点。

研究方法

1．Chemerin全敲小鼠的构建和小鼠分组

委托上海南方模式生物技术公司采用Cre-loxP系统构建全身性chemerin基

因敲除[chemerin(-/-)]小鼠。小鼠两周龄时，剪取鼠尾进行DNA检测，筛选出敲

除小鼠，并用Westernblot在蛋白水平确证chemerin全敲小鼠的成功建立。

6周龄的野生型（widetype,WT）小鼠和chemerin(-/-)小鼠，用课题组前期

造模方法，即喂以16周高脂饲料（含60%脂肪，20%蛋白质，5.24kcal/g）建立

肥胖（obesity,OB）小鼠模型（以体重超过正常对照组体重均值的20%作为肥胖

判断标准）。其余小鼠喂以相同周数的普通饲料（normaldiet,ND；含10%脂肪、

20%蛋白质，3.85kcal/g）。

为研究chemerin全敲对正常体重和肥胖小鼠骨骼肌质量的影响，将小鼠分

为4组：野生型对照组（CON）、chemerin(-/-)、OB和OB-chemerin(-/-)组。为

研究chemerin全敲在运动调控正常体重和肥胖小鼠骨骼肌质量中的作用及机制，

将普通膳食喂养的野生型和chemerin全敲小鼠分为CON组、运动（exercise,E）

组、chemerin(-/-)组和E+chemerin(-/-)组，每组6只；将肥胖的野生型和

chemerin全敲小鼠分为OB组、E+OB组、OB-chemerin(-/-)组和E+OB-

chemerin(-/-)组，每组6只。运动组在跑台上进行持续6周的中等强度有氧运动

（期间保持高脂饮食喂养），每周运动6次，每次1h。

2.检测指标和方法

各组小鼠麻醉处死后取材，收集胫骨前肌、股四头肌、腓肠肌和比目鱼肌，

天平称重小鼠体重和各肌肉质量，HE染色观察小鼠肌纤维横截面积大小。血糖

仪检测空腹血糖水平、南京建成生物科技公司试剂盒检测血脂四项。Western

blot检测小鼠股四头肌、腓肠肌、比目鱼肌的蛋白合成相关蛋白的表达和活性

（p-PI3K、PI3K、p-AKT、AKT、p-mTOR、mTOR和内参GAPDH