Chemerin在运动调控小鼠脂肪含量、分布及白色脂肪棕色化中的作用及机制.pdfVIP

中文摘要

研究目的

Chemerin是2007年发现的新脂肪因子，高表达于脂肪和肝，在调控炎症、

脂肪形成、糖脂代谢、胰岛素敏感性等过程中发挥重要作用。流行病学研究表明，

肥胖和糖尿病人血清chemerin水平异常升高，而降低chemerin水平是减轻肥胖、

改善糖脂代谢的关键。我们课题组前期研究已经证实chemerin减少在运动改善

高脂喂养（HFD）、肥胖和糖尿病大小鼠糖脂代谢中的重要作用，并探讨了骨骼

肌和肝的糖脂代谢酶机制，但chemerin影响糖脂代谢的机制仍未完全阐明。

脂肪也是一个重要的代谢器官，脂肪含量增多、脂肪分布改变、白色脂肪棕

色化等，均可影响能量消耗量和糖脂代谢。近年来研究发现，chemerin可调控脂

肪组织含量、分布，以及白色脂肪棕色化，这是其影响糖脂代谢的重要因素。脂

联素和瘦素是经典的脂肪因子，参与食欲、糖脂代谢、能量消耗、脂肪分布等的

调控。较高浓度的瘦素与内脏脂肪累积增多、糖脂紊乱有关；反之，高浓度的脂

联素则使内脏脂肪累积减少、糖脂改善。因此，本研究构建了全身性和脂肪

chemerin敲除小鼠，以证实chemerin对安静和运动的HFD小鼠脂肪含量、分布

以及白色脂肪棕色化的调控作用。进一步，研究其作用机制是否与其调控脂联素

和瘦素水平、脂联素/瘦素比值有关。最后，用chemerin重组蛋白和中和抗体证

实chemerin对3T3-L1前脂肪细胞的脂联素和瘦素水平有调控作用，从而明确

chemerin对脂肪含量、分布和白色脂肪棕色化的影响及机制。

研究方法

Chemerin敲除小鼠的构建及小鼠分组：利用loxp-cre系统构建chemerin全

敲[chemerin(-/-)]小鼠和脂肪组织chemerin敲除[adipose-chemerin(-/-)]小鼠，在基

因和蛋白水平验证两种chemerin敲除小鼠的成功建立。对动物进行分组，包括：

（1）8周龄野生型（WT）和chemerin(-/-)小鼠随机分为普通饮食（ND）组和高

脂饮食（HFD）组。各组小鼠完成6周的饮食干预后，随机分为ND和HFD的

对照组和有氧运动组，即各自的WT组、E-WT组、chemerin(-/-)组、E-chemerin(-

/-)组，共8组，每组6只。（2）8周龄的adipose-chemerin(-/-)小鼠在完成6周的

饮食干预后，也随机分为ND和HFD的对照组和有氧运动组，包括各自的WT

组、E-WT组、adipose-chemerin(-/-)组、E-adipose-chemerin(-/-)组，共8组，每组

4只。

检测指标：运动组小鼠完成6周中等强度的跑台运动后，称量各组小鼠体重，

内脏、皮下白色脂肪和肩胛间棕色脂肪含量；检测体成分；收集血清检测血脂四

项（TC、TG、HDL-C、LDL-C）、空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）水平，

计算HOMA-IR；代谢仓监测能量代谢指标（TEE、RER等）；HE染色观察皮下

和内脏脂肪以及肩胛棕色脂肪的镜下结构；Westernblot检测脂肪组织过氧化物

酶体增殖受体γ辅激活因子α（PGC-1α）、解偶联蛋白1（UCP1）的蛋白水平。

进一步，检测chemerin(-/-)和adipose-chemerin(-/-)小鼠的血清和脂肪组织（VAT、

SAT和BAT）的脂联素、瘦素水平。并在细胞水平，用外源性chemerin重组蛋

白（50ng/ml、100ng/ml、150ng/ml、200ng/ml）以及chemerin中和抗体（30

μg/ml）干预3T3-L1前脂肪细胞，48h后收集细胞，Westernblot检测细胞中脂

联素、瘦素的蛋白水平。通过上述实验来明确chemerin对安静和运动小鼠脂肪

含量、分布及白色脂肪棕色化等的影响及其机制（与调控脂联素、瘦素水平有关）。

研究结果

第一部分Chemerin在运动调控小鼠脂肪含量、分布及白色脂肪棕色化中的作

用

1.Chemerin全敲减弱了运动对小鼠脂肪含量、分布和白色脂肪棕色化的调控作

用

运动降低ND-WT和ND-chemerin(-/-)小鼠的体重、脂肪含量，以ND-WT小

鼠的减少程度更大。运动显著上调ND-WT和ND-che