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IL-37联合运动干预在小鼠创伤性骨关节炎软骨中的作用研究
IL-37联合运动干预在小鼠创伤性骨关节炎软骨中的作用研究
摘要
研究背景
Post-traumaticosteoarthritisPTOA
创伤性骨关节炎（，）是一类严重关节损伤
后发生的骨关节炎（Osteoarthritis，OA），发病率在整体骨关节炎中占比超过
12%，主要由前交叉韧带断裂、半月板撕裂等运动损伤引起，发病时间比传统骨
关节炎更早，受其影响的人群更为年轻。已有研究表明，适宜的运动训练有益于
缓解PTOA，但机制尚未明确。白细胞介素37（Interleukin-37，IL-37）是庞大的
白细胞介素1家族中少数能发挥抗炎作用的成员之一，是免疫反应的天然抑制
剂，目前已被证实在多项炎症性疾病中发挥抗炎作用，并改善小鼠的运动耐受性。
但是，目前尚未有细胞研究证实IL-37对炎症环境下的小鼠软骨细胞发挥保护作
用，IL-37联合运动干预对PTOA的影响也未可知。
研究目的
本研究旨在通过细胞实验和动物实验，多方面探究IL-37联合运动干预在小
鼠PTOA进展中对软骨的作用。
研究方法
第一部分：探究IL-37联合力学刺激对软骨细胞的影响
1.提取并培养C57BL/6新生小鼠原代软骨细胞至第三代，分为对照组（C）、
IL-1β诱导炎症组（I）和加0.1/0.5/1ng/ml三个浓度IL-37干预组（II-0.1、II-0.5、
II-1IIIL-372hIIIIL-1β
）。向各组分别加入重组蛋白。后，组与各组同时加入
诱导炎症，并使细胞培养基中最终IL-1β浓度为10ng/ml。24h后，提取软骨细
RNART-qPCRTNF-αADAMTS-5COL-ⅡmRNA
胞总，经检测、、的表达水平，
IF
经检测蛋白表达水平。
2.确认IL-37干预小鼠软骨细胞的效果和IL-37的有效浓度后，提取并培养
C57BL/6J新生小鼠原代软骨细胞，培养至第三代时将细胞种在牵拉板上，分为
对照组（C）、IL-1β组（I）、IL-37+IL-1β组（II）、牵拉组（S）、IL-1β+牵拉
组（SI）、IL-37+IL-1β+牵拉组（SII）。其中，II组、SII组按先前确认的浓度
IL-372hIIISISIIIL-1β
加入重组蛋白，后，组、组、组、组同时加入，并使细
胞培养基中最终IL-1β浓度为10ng/ml；对照组常规培养，不做任何干预。加药
24hFlexcellFX-5000SSISII
后，采用细胞应力加载系统对组、组、组进行机
10%0.5Hz
械牵张力刺激干预，牵拉干预方案设为牵张强度：，牵张频率：，牵
张时间：1h。其余组在同一培养箱中放置，不牵张。实验结束后，通过RT-qPCR
检测、AnnexinV-FITC细胞凋亡检测、IF检测和WB检测观察IL-37联合力学刺
激对小鼠软骨细胞功能的影响。
第二部分：探究IL-37联合运动干预对小鼠PTOA发展的作用
I
IL-37联合运动干预在小鼠创伤性骨关节炎软骨
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