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第三届学研讨会集
刍议‘参比法准确测量荧光量子产率的要点
（大学化学与分子科学学院，430072）
：荧光量子产率是荧光物质的重要发光参数。本文就参比法如何准确
获得荧光量子产率，针对多项测量要素进行了详细的论述和归纳。
；荧光量子产率；参比法；测量；要点
如何获得准确可靠的荧光量子产率，在参比长和光谱范围均相近的荧光物才能有效
法’具体操作上涉及许多相关测量要素和知识，但获得准确的荧光量子产率°例如，B（乙醇
在一般和分子荧光光谱理章中只有方+0.01HCI）的激发波长为土505皿，光谱范
法的简略综述，而没有具体测量方面的操作及详围为600~650nm,荧光素钠的光谱范围在
细要点介绍。该测量项目需要紫外•可见仪和分子500-600nm,测定荧光素钠的量子产率时可以选
荧光仪配合使用，涉及到标样和测量条件的选择,择B作为荧光物。而0.1mol/L奎宁硫
技术性强且操作复杂，即使较熟练的测量者都难酸盐的激发波长为±346nm,它的范围在400
以得心应手地获取准确结果。然而，测量结果的~g0nm因而就不适合做荧光素钠的荧光
准确与否却与测量过程中的诸多操作技能有密切物。
关系。通过实践，本文经验性归纳几点测量要点，2待测荧光物质和荧光参比物的浓度均需要
意与共勉切磋，满足吸光度小于宽等于0.05（或0.10）的条件
1正确选择荧光参比物保证荧光待测物和荧光参比物既能在紫
在‘参比法中，一般采用所选物的激发外光谱仪上各自测量出吸光度小于或等于0.05
波长作为测定该物和待测物光谱的激发（或0」0）的吸光度（A）,又要同时在分子荧光光谱
波长，该物的量子产率应为已知，且所选标仪上能用相同测量条件和激发波长分别绘制出大
准物的光谱与待测物的波长范围基本相小合适的荧光光谱。待测荧光物质和荧光样
近°这样才能尽量减小荧光量子产率的测量误差。的积分面积很重要，将直接影响其量子产率的最
因为，荧光量子产率是定义为荧光物质吸光终计算值的推确性。由于纵坐标强度值与溶液的
后所荧光的光子数与所吸收激发光的光子数浓度有关，所以所测的物和待测荧光物质的
之比。而参比法即通过比较待测荧光物质和已浓度要适宜才有助于得到理想的测量结果。从计
知量子产率的参比荧光物质两者的稀溶液在同样算中可知，测量荧光量子产率不要求知道荧
激发条件下所测得的积分荧光强度和对该激发波光物质的准确浓度，但须符合朗伯-比尔定律的稀
长的人射光的吸光度而加以测量分子荧光的量子溶液体系，应分别能满足其紫外•可见所测的吸光
产率，所以，选择某一个荧光物质作参比标样时，度小于或等于0.05（或0.
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