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实验十九根瘤或土壤中固氮酶活性的测定第1页,共9页,星期日,2025年,2月5日实验十九根瘤或土壤固氮酶活性的测定*第2页,共9页,星期日,2025年,2月5日根瘤或土壤固氮酶活性的测定目的要求实验材料实验程序思考题第3页,共9页,星期日,2025年,2月5日目的要求
初步掌握根瘤或土壤样品中固氮酶活性测定的方法第4页,共9页,星期日,2025年,2月5日实验材料豆科植物根瘤或土壤样品。102G型气相色谱仪/标准乙烯灵敏度为103,衰减为1/128。待测样品中乙烯测定:灵敏度为104,衰减为1/1。(但可根据固氮酶活性,改变灵敏度和衰减)。乙炔气体。100mL带有异丁基胶塞的血清瓶。1mL、10mL(密封性能好的)注射器,100mL微量注射器第5页,共9页,星期日,2025年,2月5日实验程序根瘤固氮活性的测定土壤固氮酶活性的测定乙烯含量的计算第6页,共9页,星期日,2025年,2月5日实验程序Ⅰ(根瘤固氮活性的测定)从田间挖取豆科植物植株,剪掉地上部分,根部洗净,稍干,将结瘤的根系部分分别剪开,主根上的瘤可直接剥下,侧根上的瘤要带少量根剪断,将鲜根瘤称重,收集到100mL血清瓶中,立即用异丁基胶塞密封,然后按瓶子中气相体积用注射器从瓶中抽出5—10%的空气,再用注射器注入等体积的C2H2,280C保温2h。取出瓶子,用注射器吸出100uL的混合气体,用气相色谱仪以外标法测定其固氮酶活性。第7页,共9页,星期日,2025年,2月5日*
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