芒果MiKAO1基因的克隆、亚细胞定位及表达分析.pdfVIP

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分子植物育种,2025年,第23卷,第8期,第2519-2526页

MolecularPlantBreeding,2025,Vol.23,No.8,2519-2526

研究报告

ResearchReport

芒果MiKAO1基因的克隆、亚细胞定位及表达分析

*

荣涛张宇黄国弟庞新华单彬朱杨帆张继陆祖双

广西壮族自治区农业科学院广西壮族自治区亚热带作物研究所,南宁,530001

*通信作者,375900554@

摘要贝壳杉烯酸氧化酶-kaurenoicacidoxidase,KAO)是赤霉素(gibberellins,GAs)生物合成途径中关

ent

键酶之一。赤霉素具有调控植株生长的作用,本研究为深入解析KAO基因在芒果生长发育中的作用提供一

定理论依据。对‘桂热芒82号’MangiferaindicaL.cv.GuireNo.82)中KAO基因进行克隆、亚细胞定位和表

达分析。以‘桂热芒82号’叶片为材料提取RNA,进行RT-PCR得到cDNA,再通过RACE获得该基因序列,

并将该基因命名为MiKAO1。采用实时荧光定量RT-PCR方法研究了MiKAO1基因在‘桂热芒82号’和‘金

煌芒’中的表达。MiKAO1全长为2256bp,3非翻译区约2500bp,5非翻译区约2500bp。MiKAO1序列均

含有完整的开放阅读框,编码517个氨基酸,与阿月浑子(XP_031279374.1)的序列相似度为83.17%。MiKAO1

编码的蛋白分子量为58710.13Da,等电点为8.67,推测为稳定蛋白,无信号肽,无明显疏水区,存在较明显

跨膜结构域。利用共聚焦激光扫描显微镜发现MiKAO1编码蛋白定位于细胞质中。基因表达分析显示,

MiKAO1基因在芒果萌芽期、开花期、坐果3~4周、坐果7~8周和果实成熟期‘金煌芒’的表达量无明显差异;

而该基因在‘桂热芒82号’的表达量呈现先上升再下降的变化趋势,说明通过MiKAO1基因的表达量的变

化情况无法判断该基因是否具有调控矮化性状的作用。

关键词桂热芒82号;亚细胞定位;表达分析;MiKAO1;矮化

Cloning,SubcellularLocalizationandExpressionAnalysisofMiKAO1

GeneinMangiferaindicaL.

*

RongTaoZhangYuHuangGuodiPangXinhuaShanBinZhuYangfanZhangJiLuZushuang

GuangxiSubtropicalCropsResearchInstitute,GuangxiAcademyofAgriculturalSciences,Nanning,530001

*Correspondingauthor,375900554@

DOI:10.13271/j.mpb.023.002519

AbstractTheent-kaurenoicacidoxidaseisoneofthekeyenzymesingibberellinsbiosynthesispathway.

Gibberellincanregulateplantgrowth.Thisstudyprovidesatheoreticalbasisforfurtheranalyzingthefunctionof

geneinmangogrowthanddevelopment.ThegeneofinL.cv.GuireNo.82was

KAOKAOMangiferaindica

clonedandsubcellularlocalizationandexpressionwereanalyzed.RNAwasextractedfromleavesofGuireNo.82,

cDNAwasobtainedbyRT-PCR,andthegenesequencewasobtainedbyRACE,andthegenewasnamedMiKAO1.

TheexpressionofMiKAO1geneinGuireNo.82andJinhuangmangwasstudiedbyreal-timefluorescence

quan

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