样品前处理技术基础理论.pptxVIP

WatersChemistryOperations

培训概要样品前处理的重要性及原则一样品前处理一般性步骤二样品前处理方法及比较三固相萃取技术四

样品前处理的重要性及原则一样品前处理一般性步骤二样品前处理方法及比较三固相萃取技术四

重要性样品前处理在色谱分析过程中是一个既耗时又极易引进误差的步骤，样品处理的好坏直接影响色谱分析的最终结果，因此，为了提高分析测定效率，改善和优化色谱分析样品制备方法和技术是一个重要问题。由于食品样品属于复合基质体系,多含有蛋白、油脂,碳水化合物、色素等成分,复杂的基质背景会对被分析目标化合物的提取、分离、净化和测定等带来很大的麻烦,因此食品的样品前处理不仅复杂困难,而且对于分析结果的准确可靠和灵敏具有决定性作用。0102样品前处理的重要性

为何需要样品前处理?色谱分析的误差来源

为何需要样品前处理?样品前处理所消耗时间

为何需要样品前处理?60%以上的工作和费用花费在样品前处理上三个目的:除去样品基质中的干扰物富集组分增强仪器的性能对于LC/MS/MS高灵敏度的仪器,适当的样品前处理对于减少基质干扰和富集组分至关重要！

01.制备过程中避免组分发生化学变化；02.要防止和避免欲测定组分的沾污；03.尽可能减少无关化合物引入制备过程；04.尽可能简单易行。原则样品前处理原则

样品前处理的重要性及原则样品前处理一般性步骤固相萃取技术样品前处理方法及比较

根据样品类别和被分析物的结构、极性等理化性质选择合适的提取溶剂提取离心过滤液-液萃取SPESPME……净化GCGC-MSHPLCLC-MSCE……测定样品处理一般性步骤

样品前处理的重要性及原则样品前处理方法及比较样品前处理方法及比较固相萃取技术

样品预处理技术分析被测物在样品基质中提取

除去微粒减少干扰杂质浓缩微量的组份提高检测的灵敏度及选择性改善分离的效果有利于色谱柱及仪器的保护溶剂置换样品预处理的目的

占样品分析时间的比例占分析的消耗总成本最大实验的重复性及准确性最差的环节样品预处理所用时间远大于色谱分离的时间影响实验结果好坏的最重要因素是决定性的步骤消耗大量的溶剂及其他化学品样品的预处理重要性

常见样品前处理方法常见样品前处理包括:液液萃取稀释固相萃取离心过滤样品前处理沉淀

方法 选择性基础01沉淀 溶解度02液—液萃取 样品在两相中的分配03固相提取 样品在吸附剂上的吸附与分配04渗析/超滤 分子量与体积05电泳 电荷/淌度06蒸馏/蒸发 沸点与蒸气压07样品前处理的各种方法

传统的样品前处理方式

液液萃取(LLE)根据分析物在互不相溶的两相中的溶解度差异来将分析物从一相提取至另一相中。装置简单操作容易常被认定为成本低廉费时费力常因乳化效益使相间分层不彻底，使得重复样的分析结果存在显著偏差(常在10%~20%之间)若需萃取的样品体积大（如环境分析中），则可能消耗大量的有机溶剂。由此可能在购买、储藏、处置溶剂时花费庞大*。注:大量储存、使用和处置溶剂可对操作者的长期健康产生负面影响，并可带来火灾隐患有机层水层

传统的样品前处理方式

蛋白质沉淀法(PPT)1-吸取200?L血浆2-加入400-600?l乙腈3-高速混合4-离心取上清液5-以水稀释后进样在血清、血浆或尿样中加入有机溶剂，使样品中的蛋白质沉淀，然后经离心去除简单快速可被自动化，适用于高通量分析若检测限要求不高时较适用属快速但粗糙的净化技术，仅可去除约90-95%的蛋白质，而基质中的高盐份和其他内源性干扰物如磷脂等完全未被去除（此为LC/MS分析时遭遇离子抑制的根源!）分析柱寿命较短，LC/MS系统常需停机进行离子源清洗导致样品稀释,不适合用于超痕量分析场合进样前可能需要进行溶剂蒸发以获得足够的灵敏度(若无内标，分析重现性不佳)

固相萃取技术(SPE)

先进的样品前处理方法可同时取得对样品的净化与富集效果，彻底去除干扰物并浓缩样品分析结果呈高度可靠性使得检测灵敏度和选择性大大提高明显延长色谱柱寿命，减小系统维修的频度样品制备快速、涉及人工少、溶剂用量少分析结果的精密度提高(偏差常5%)多样化的产品设计迎合不同样品通量要求依据目标化合物在固定相和流动相间分配系数的不同将其从液相提取至固定相中（本质上为色谱分离方法）

样品前处理的重要性及原则01样品前处理方法及比较02样品前处理一般性步骤03固相萃取技术04

概念固相提取（SolidPhaseExtraction，SPE)是一种重要的样品前处理技术，由液固萃取和柱液相色谱技术相结合发展起来的。利用固相吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附，与