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解码运动学习：运动皮层神经元集群电活动的动态演变

一、引言

二、研究方法

2.1实验动物与模型建立

本研究选用成年健康的C57BL/6小鼠作为实验动物，小鼠具有繁殖周期短、成本低、遗传背景清晰等优点，并且其神经系统在结构和功能上与人类有一定的相似性，适合用于神经科学相关研究。为构建运动学习模型，采用小鼠推杆运动任务。实验装置由一个带有可移动推杆的操作箱组成，推杆与食物奖励装置相连。在训练过程中，小鼠被放置在操作箱内，当小鼠推动推杆达到一定位移时，食物奖励装置会释放食物颗粒作为奖励。通过逐渐增加推杆位移的难度和对动作准确性的要求，引导小鼠学习并掌握推杆运动技能。每天训练1小时，连续训练14天。在训练前，小鼠需进行适应性饲养3-5天，使其适应实验室环境。在训练过程中，密切观察小鼠的行为表现和学习进度，确保每只小鼠都能有效参与运动学习任务。

2.2神经元电活动记录技术

2.2.1多电极阵列技术

多电极阵列（Multi-ElectrodeArray，MEA）技术是本研究用于记录神经元集群电活动的关键技术之一。MEA通常由多个微电极组成，这些微电极以特定的阵列形式排列在芯片上，可将其植入小鼠的运动皮层。当神经元产生动作电位时，会在细胞外产生微小的电位变化，MEA上的微电极能够捕捉这些电位变化，从而实现对神经元电活动的同步记录。其优势在于能够同时记录多个神经元的活动，提供神经元集群层面的信息，有助于研究神经元之间的相互作用和信息传递。并且MEA具有较高的时间分辨率，能够精确捕捉神经元动作电位的发放时刻，满足对神经元电活动动态变化研究的时间精度要求。此外，MEA记录是一种非侵入性或微创性的方法，对神经元的损伤较小，可在较长时间内对同一批神经元进行连续监测，为研究运动学习过程中神经元电活动的长期变化提供了可能。

2.2.2双光子成像技术

双光子成像技术基于双光子吸收效应，利用近红外激光激发荧光探针来实现对神经元活动的追踪。当两个近红外光子同时作用于荧光分子时，荧光分子吸收这两个光子的能量并跃迁到激发态，进而发射出荧光。在本研究中，首先对小鼠进行颅骨开窗手术，在颅骨表面制造一个透明的窗口，以便双光子显微镜能够清晰观察到运动皮层神经元。然后向小鼠运动皮层注射钙离子敏感荧光指示剂，当神经元活动时，细胞内钙离子浓度升高，荧光指示剂与钙离子结合，荧光强度增强，通过检测荧光强度的变化，即可间接反映神经元的活动情况。双光子成像技术具有高分辨率和高穿透深度的特点，能够在活体动物大脑中对神经元进行单细胞水平的成像，清晰观察神经元的形态和活动，为研究单个神经元在运动学习中的作用提供了有力工具。该技术可以与多电极阵列技术结合使用，多电极阵列技术提供神经元电活动的时间序列信息，双光子成像技术提供神经元的空间分布和形态信息，两者相互补充，更全面地揭示运动学习过程中神经元电活动的动态变化机制。

2.3数据分析方法

对于记录得到的神经元电活动数据，采用多种分析方法进行处理和解读。首先进行动作电位检测，通过设定合适的阈值，识别出原始电信号中超过阈值的部分，将其判定为动作电位，从而确定神经元的放电时刻。然后计算放电频率，统计单位时间内神经元的动作电位发放次数，放电频率的变化可以反映神经元的兴奋程度和活动状态的改变，在运动学习过程中，随着学习的进行，某些神经元的放电频率可能会逐渐增加或减少，以适应新的运动任务需求。接着进行相关性分析，计算不同神经元之间动作电位发放时刻的相关性，以了解神经元之间的功能连接和信息传递关系。如果两个神经元的放电时刻具有较高的相关性，说明它们之间可能存在较强的功能联系，共同参与特定的神经活动。还可以运用主成分分析等降维方法，对高维的神经元电活动数据进行处理，提取主要成分，减少数据维度，同时保留数据中的关键信息，从而更直观地展示神经元电活动在运动学习过程中的动态变化模式，挖掘数据背后隐藏的神经机制。

三、运动学习过程中运动皮层神经元集群电活动的动态变化特征

3.1学习初期的电活动变化

3.1.1神经元放电频率的变化

在运动学习的初期，神经元放电频率通常会发生显著变化。以小鼠推杆实验为例，在小鼠刚刚接触推杆任务时，运动皮层中许多神经元的放电频率会迅速升高。这是因为小鼠需要高度集中注意力来探索和尝试完成新的运动任务，神经元需要快速传递信息以协调肌肉运动。研究数据表明，在训练的前几次尝试中，部分神经元的放电频率相较于基线水平可提高50%-100%。这些高频率放电的神经元主要集中在运动皮层中与运动规划和执行相关的区域，如初级运动皮层和前运动皮层。它们的活动增强有助于小鼠快速调整肌肉的收缩和放松，以适应推杆的动作要求。然而，随着学习的继续进行，神经元放电频率并不会一直保持在高水平。当小鼠逐渐熟悉推杆