第二章实验室设备和一般技术.pptVIP

第29页，共66页，星期日，2025年，2月5日第30页，共66页，星期日，2025年，2月5日第31页，共66页，星期日，2025年，2月5日第二节器皿用具一、组培器皿（一）器皿的类型培养器皿分注器离心管刻度移液管细菌过滤器第32页，共66页，星期日，2025年，2月5日1．培养器皿（1）概念

培养器皿---指用于盛放培养基和接种培养材料的器皿。要求透光度好，能耐高压灭菌。第33页，共66页，星期日，2025年，2月5日（2）类型按材料分：玻璃培养器皿：优点是透光度好、容易清洗；缺点是容易破碎；塑料培养器皿：优点是不容易破碎、成本较低，但缺点是透光度较玻璃的差、遇火焰易被熔化。第34页，共66页，星期日，2025年，2月5日按形状分试管——特别适合于用少量培养基及试验各种不同配方时选用，在茎尖培养及花药和单子叶植物分化长苗培养时更显方便。有圆底的和平底的两种。三角瓶——是植物组织培养中最常用的培养器皿，适合于各种培养，固体或液体、大规模或小规模都行。其优点是：采光好、瓶口较小不易失水和污染。L形管和T形管——为专用的旋转式液体培养试管。培养皿——适于作单细胞的固体平板培养、胚和花药培养和无菌发芽。角形培养瓶和圆形培养瓶——适于液体培养用。果酱瓶——常用于试管苗大量繁殖，200ml-500ml规格第35页，共66页，星期日，2025年，2月5日2．分注器作用---分装培养基。分注器可以把配置好的培养基按一定量注入到培养器皿中。一般由4cm-6cm的大型滴管、漏斗、橡皮管及铁夹组成。还有量筒式的分注器，上有刻度，便于控制。微量分注还可采用注射器。第36页，共66页，星期日，2025年，2月5日3．离心管离心管用于离心，将培养的细胞或制备的原生质体从培养基中分离出来，并进行收集。第37页，共66页，星期日，2025年，2月5日4．刻度移液管在配制培养基时，生长调节物质和微量元素等溶液，用量很少，只有用相应刻度的移液管才能准确量取。同时，不同种类的生长调节物质，不能混淆，这就要求专管专用。常用的移液管容量有0.1ml、0.2ml、0.5ml、2ml、5ml、10ml等。第38页，共66页，星期日，2025年，2月5日移液器第39页，共66页，星期日，2025年，2月5日培养基中有些生长调节物质以及有机附加物质如吲哚乙酸（IAA）、赤霉素（GA）等，在高温条件下易被分解破坏，而用细菌过滤器（图1—7）既可除菌又可保持试剂的功效。可用金属制的蔡式漏斗，以石棉滤膜来除去细菌。在过滤少量的液体时，宜用醋酸纤维素和硝酸纤维素混合物制成的微孔滤膜，其孔径为0.45μm。在过滤时需要一套减压吸滤设备（通常使用真空泵），漏斗下接吸滤瓶，吸嘴处接上一只内装脱脂棉的滤气玻璃管。5．细菌过滤器第40页，共66页，星期日，2025年，2月5日图1—7细菌过滤器灭菌装置第41页，共66页，星期日，2025年，2月5日（二）器皿的清洗植物组织培养除了要对待培养的实验材料和接种用具进行严格消毒外，各种培养器皿也要求洗涤清洁，以防止带入一些有毒的或影响培养效果的化学物质或一些微生物等，对那些常用的玻璃器皿的清洁程度要求更为严格。第42页，共66页，星期日，2025年，2月5日1．洗涤剂——清洗玻璃器皿用的洗涤剂主要有肥皂、洗洁精、洗衣粉和铬酸洗涤液（由重铬酸钾和浓硫酸混合而成）。配制铬酸洗涤液的注意事项：

（1）在配制时重铬酸钾一定要冷却后才能加浓硫酸，且只能把浓硫酸缓慢加入重铬酸钾溶液中，决不能将重铬酸钾溶液或蒸馏水倒入浓硫酸中。（2）由于铬酸洗涤液具有极强的氧化能力和腐蚀作用，故不要用手直接接触洗涤液。第43页，共66页，星期日，2025年，2月5日2．洗涤方法新的：使用前先用1%稀盐酸浸泡1夜，然后用肥皂水洗净，清水冲洗，最后用蒸馏水冲淋1遍，干后备用。已用过的玻璃器皿洗涤方法：去残渣——水洗——热肥皂水（或洗洁精）——水洗——蒸馏水冲洗1次。较脏的玻璃器皿的洗涤：洗衣粉或洗洁精刷洗几次并冲净——浸入洗涤液中——流水中冲洗——蒸馏水冲洗。第44页，共66页，星期日，2025年，2月5日已被霉菌等杂菌污染的玻璃器皿的洗涤：121℃高温高压蒸汽灭菌30min——趁热倒去残渣——清水中冲洗——浸泡在浓的重铬酸钾洗涤液中——2h后取出——水洗数次——蒸馏水冲淋1次。用过的吸管和滴管的清洗：洗涤液中浸泡2h以上——取出在流水中冲洗半小时——蒸馏水冲淋1次。第45