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动物医学进展,2025,46(10):1-7

ProgressinVeterinaryMedicine

研究论文

丙型副伤寒沙门氏菌噬菌体的分离鉴定及分析

田嘉琪12.3,周雯雯1,2.3,章石楠1.2.3,李淑萍2.3,胡国元2.3,蔡进忠²

防控技术研究重点实验室,青海西宁810003)

摘要:为了研究沙门氏菌噬菌体的生物学特性、基因组特点,从兰州的奶牛养殖场分离噬菌体,采用双

层平板法纯化、超速离心法浓缩、透射电镜观察噬菌体形态;测定噬菌体宿主谱、一步生长曲线、最佳感染复

数、酸碱和热稳定性等生物学特性,并提取了噬菌体基因组进行测序和分析。结果表明,分离得到了1株丙

型副伤寒沙门氏菌(SalmonellaparatyphiC,SPC)噬菌体,将其命名为SP2,形态观察显示,SP2的头部呈

多面体,直径为70nm,具有收缩性的尾巴,长约130nm;潜伏期为40min,暴发期为40~200min,最佳感染

复数为0.001;在温度≤50℃、pH为4~11时活性良好;SP2基因组全长为85702bp,含124个开放阅读框

(ORFs),仅36个ORFs为已知的编码基因,含有21个转运RNA(transferRNA,tRNA),

毒力基因和溶原基因,SP2生物学特性稳定,遗传背景清晰,以期为今后噬菌体疗法奠定基础。

关键词:沙门氏菌;噬菌体;生物学特性;形态学;基因组

中图分类号:S852.61文献标识码:A

沙门氏菌(Salmonella)是一种人兽共患的革兰

氏阴性菌,广泛存在于自然界,是重要的食源性致病

菌[1-21。全球每年沙门氏菌感染可引起9380万人发

获得、研发成本低、不会破坏机体正常微生物等优

病[3]。近年来,随着抗生素的滥用,沙门氏菌的多重

耐药现象日益加重,尤其对β-内酰胺类和头孢类抗生

素已经产生耐药性4。沙门氏菌的多重耐药现象不伤寒沙门氏菌的噬菌体,可为噬菌体疗法代替抗生素

仅给动物沙门氏菌病的防治带来了巨大挑战,而且耐疗法奠定基础。

药性也会随着食物链转移到人类,随着全球贸易在世

1材料与方法

界范围内传播,严重威胁着社会公共卫生安全[5]。

沙门氏菌血清型众多,目前大约已经有2600种1.1材料

血清型,包括肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、伤寒沙1.1.1菌株沙门氏菌,来源于青海省动物疾病病

门氏菌、副伤寒沙门氏菌等,其中副伤寒沙门氏菌包原诊断与绿色防控技术研究重点实验室。沙门氏菌

括甲、乙、丙型副伤寒沙门氏菌[6]。甲型副伤寒和乙SM2206-1经过血清学鉴定为丙型副伤寒沙门氏菌。

型副伤寒沙门氏菌引起的症状与伤寒相似,但病死率1.1.2主要试剂LB培养基,青岛海博生物科技有

较低。丙型副伤寒沙门氏菌引起的症状较为不同,可限公司产品;PEG8000,氯化,北京索莱宝生物科

表现为急性胃肠炎或脓毒血症。近年来丙型副伤寒技有限公司产品;1%磷钨酸溶液,北京普西唐生物

沙门氏菌的流行趋势愈发严重[7-10],随着发病率上升,科技有限公司产品。

多重耐药菌株的出现,丙型副伤寒沙门氏菌的防治变1.1.3主要仪器超微量分光光度计(Tnano-

得愈发困难。700),拓赫机电科技(上海)有限公司产品;高速冷冻

随着国家对抗生素耐药性的重视,噬菌体离心机(2-16R),湖南恒诺仪器设备有限公司产品;

(Phage)研究也逐渐火热[11。噬菌体是能感染细菌细透射电镜(HT7800),日本日立公司产品。

收稿日期:2024-09-11

基金项目:国家重点研发计划项目(2022YFD1602304);青海省科技成果转化与研发计划资助项目(2022-NK118)

作者简介:田嘉琪(1999一),男,河北邯郸人,硕士研究生,主要从事噬菌体防控技术研究。*通讯作者

2动物医学进展2025年第46卷第10期(总第388期)

1.2方法菌混合,加入LB液体培养基中,摇床37℃、180r/min

1.2.1噬菌体的分离本研究所用污水均来源于兰培养6h。取1mL培养液过滤除菌,通

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