第六讲典型生物催化的反应生成.pptVIP

第六讲典型生(Sheng)物催化的反应生(Sheng)成演示文稿;优选第六讲(Jiang)典型生物催化的反应生成;最早在(Zai)70多年前发现，催化己糖和其3C亚基反应

目前底物范围广，酶种类非常多

在醛或者酮的羰基上高度立体选择性的加

上1C、2C或者3C部分

主要有两类：不需要金属辅酶（高等植物和

动物中），反应中形成希夫碱

需要Zn2+，主要存在于细菌

和真菌中;第四页，共五十九页。;第五页，共五十九页。;酮为供体，醛为受体

绝大多数醛缩酶对供体底物（亲核试剂）结构要求(Qiu)很高，对受体底物（亲电试剂）结构要求(Qiu)不高

根据供体底物的类型分为四组，受体为醛，反应后受体醛的碳链分别延长2-3个C;第七页，共五十九页。;第八页，共五十九页。;;R（天然底物）;底物范围：天然底物的结构类似物为底物，催化合成碳水化合物或其类似物，如催化含氮或者含硫糖类以及脱氧糖等。

受体醛和天然受体底物D-3-磷酸-甘油醛结构差别很大，一般要遵循以下规则：

1、无位阻的脂肪族醛、a-杂原子取代醛、保护的烷氧基醛可作为底物

2、具有严重位阻的脂肪族醛，如三甲基乙醛不能作为底物，α,β-不饱和醛和容易发生α,β消除反应的醛也不能作为底物

3、芳香醛反应性很差

4、ω-羟基醛的末(Mo)端羟基磷酸化产物比未磷酸化底物反应速度快;供体要求非常严格，上式是可作为RAMA底物的DHAP类似(Si)物，反应速度降低一个数量级;糖类化合(He)物合(He)成

抗HIV

化学酶法合成;外性激素的合(He)成;提高对映体选择性（α-取代醛产生消旋化）

1、动力学控制

2、热力学控制：产物稳定性，反应可逆

3、形成的(De)非对映体酮糖中的(De)D-酮糖（DL）转化为D-醛糖，然后进行分离纯化;第十六页，共五十九页。;醛糖的(De)合成;第十八页，共五十九页。;唾液酸醛缩酶：丙(Bing)酮酸依赖型，

用于制备体外α-酮酸衍生物

丙酮酸需要过量：平衡常数接近1;乙(Yi)醛;R;2转酮醇(Chun)酶;第二十三页，共五十九页。;转酮醇酶可(Ke)以从酵母和菠菜中提取

基因工程菌高效表达

比醛缩酶对醛基部分的手性识别能力强

优先催化R??映体的反应，可以进行动力学拆分

α位无取代基的醛作为受体，反应的立体选择性降低;3偶姻反(Fan)应;第二十六页，共五十九页。;第二十七页，共五十九页。;醛基和碳碳双(Shuang)键也可以被面包酵母还原;4Michael加(Jia)成反应;第三十页，共五十九页。;水解酶催(Cui)化的M加成反应;亲核试剂;加成和消去反(Fan)应;链长不超过6C的直链脂肪醛和α,β不饱和醛、α位甲基取代醛、甲基酮都可以作为底物，乙基酮转化率很低

S-醇氰酶主要来源于高梁(Liang)类植物，如三叶胶，苜蓿等

反应速度较慢，产物光学纯度不高

氰醇的消旋：酸性pH，水含量低，其他供体;第三十五页，共五十九页。;R1;R1;水和氨的加成反应

富(Fu)马酸酶：水加成到富马酸形成L-苹果酸

天冬氨酸酶：氨加成到富马酸生成L-天冬氨酸

反式加成，底物特异性高，立体选择性好;第三十九页，共五十九页。;第四十页，共五十九页。;糖基转移(Yi)反应;在基础研究和应用研究中都非常重要

直接(Jie)分离提取困难：不经济（含量低、类似物多）

化学合成过程复杂，保护－脱保护，总产率低

生物合成是较好的选择;1、糖基转移酶（Glycosyltransferases）

负责体内寡糖的(De)合成

单糖需要磷酸化进行活化

核苷酸磷酸化－Leloir

磷酸基团磷酸化－非Leloir

高度的底物专一性和立体选择性

2、糖苷酶（glycosidases）

水解酶类，水解多糖形成寡糖和单糖，专一性较差;每一个(Ge)NDP糖有一个相应的转移酶;Leloir途径：二(Er)磷酸核苷糖（NDP糖）

糖基转移酶

β-半乳糖基转移酶：糖基供体为UDP－Gal（尿苷二磷酸－半乳糖）;Leloir;非(Fei)Leloir;糖苷酶：外糖苷酶，内糖苷酶

较高的底物专一性，但不是绝对底物专一性，对糖苷配基缺乏特异性

另一种亲核性强的