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人类白细胞抗原(HLA)高分辨基因分型检测知情同意书

患者/委托人（以下简称“您”）：

为帮助您充分了解人类白细胞抗原（HLA）高分辨基因分型检测的相关信息，保障您的知情选择权，现向您说明本检测的目的、方法、风险、结果意义及您的权利义务等内容，请您仔细阅读并确认理解后签署本同意书。

一、检测目的与适用场景

人类白细胞抗原（HLA）是人类主要组织相容性复合体（MHC）的编码产物，广泛分布于几乎所有有核细胞表面，在免疫系统识别“自身”与“非己”抗原、介导免疫应答中起核心作用。HLA基因具有高度多态性，其等位基因差异直接影响器官/造血干细胞移植的排斥反应风险、部分自身免疫性疾病的发病机制及药物不良反应的易感性。

本检测采用高分辨基因分型技术（精确至等位基因水平），主要用于以下临床场景：

1.器官/造血干细胞移植配型：通过检测供者与受者的HLA等位基因匹配程度，评估移植后发生移植物抗宿主病（GVHD）或宿主抗移植物病（HVGD）的风险，为移植方案制定（如选择最佳供者、调整免疫抑制方案）提供关键依据。高分辨分型可区分低分辨检测无法识别的等位基因差异（例如HLA-A02:01与HLA-A02:02），显著提高配型准确性。

2.自身免疫性疾病辅助诊断：部分HLA等位基因与特定自身免疫病存在强关联（如HLA-B27与强直性脊柱炎、HLA-DRB104:01与类风湿关节炎）。高分辨检测可辅助临床医生明确疾病分型、评估进展风险及预后。

3.药物不良反应预测：某些药物（如卡马西平、别嘌醇）的严重皮肤不良反应（如Stevens-Johnson综合征）与特定HLA等位基因（如HLA-B15:02、HLA-B58:01）高度相关。通过检测可提前预警，降低用药风险。

4.其他临床研究：在HLA相关疾病机制研究、疫苗免疫原性评估等领域，高分辨分型可为科研提供精准的基因数据支持。

二、检测内容与技术方法

（一）检测基因位点

本检测覆盖HLA系统中与临床最相关的Ⅰ类和Ⅱ类基因位点，具体包括：

-Ⅰ类基因：HLA-A、HLA-B、HLA-C（检测范围涵盖外显子2-4，覆盖主要抗原结合区）；

-Ⅱ类基因：HLA-DRB1、HLA-DQB1（检测范围涵盖外显子2，编码抗原呈递关键区域）；

-根据临床需求，可扩展检测HLA-DPA1、HLA-DPB1、HLA-DQA1等其他位点（需额外说明并取得您的同意）。

（二）检测技术原理

本检测采用国际公认的高分辨分型标准方法，主要技术平台包括：

1.Sanger测序法（SBT）：通过对目标基因片段进行PCR扩增后双向测序，直接读取DNA序列，精确识别等位基因。适用于大多数HLA位点的高分辨分型，结果准确性高（错误率＜0.1%）。

2.下一代测序（NGS）：基于高通量测序技术，同时检测多个HLA位点的全外显子甚至全基因序列（如HLA-A、B、C的外显子1-8），可识别传统SBT无法检测的复杂变异（如插入、缺失、重组），适用于疑难样本或需要多位点同时检测的场景。

（三）检测流程

检测流程严格遵循《临床基因扩增检验实验室管理办法》及ISO15189质量体系要求，具体步骤如下：

1.样本接收与核查：核对样本标识（姓名、编号、采集时间）、类型（外周血EDTA抗凝管）及质量（无溶血、凝块，体积≥2ml），不符合要求的样本将通知重新采集。

2.DNA提取：采用磁珠法或柱提法从全血中提取基因组DNA，经定量（Nanodrop/荧光定量）确保浓度（≥20ng/μl）与纯度（OD260/280=1.8-2.0）符合测序要求。

3.目标区域扩增：针对不同HLA位点设计特异性引物，进行多重PCR扩增，确保覆盖所有外显子及部分内含子（用于区分高度同源等位基因）。

4.测序与数据分析：SBT法通过ABI3730xl基因分析仪进行毛细管电泳测序，NGS法通过Illumina或OxfordNanopore平台进行高通量测序；原始数据经专业软件（如Assign、SeqPilot）比对HLA数据库（IPD-IMGT/HLA数据库，最新版本），识别等位基因并生成初步分型结果。

5.结果审核与验证：由具备医学检验资质的专业技术人员对结果进行双人核对，疑难结果通过重复实验、额外引物扩增或家系验证（如需）确认，最终出具加盖实验室公章的正式报告。

三、样本采集与注意事项

（一）样本类型与采集方式

本检测需采集外周静脉血（儿童或特殊人群可采集指尖血或脐带血，需提前说明），使用EDTA抗凝管（紫色帽），采集量为2-5ml（具体以实验室要求为准）。

（二）采集过程与可能的不适

样本采集由具备资质的医护人员操作，过