DB15T 4195-2025 牛结节性皮肤病样品采集技术规范.docxVIP

ICS11.220CCS

ICS

11.220

CCS

B41

内 蒙 古 自 治 区 地 方 标 准

DB15/T4195—2025

牛结节性皮肤病样品采集技术规范

TechnicalSpecificationsforSampleCollectionofLumpySkinDisease

2025-09-30发布 2025-10-30实施

内蒙古自治区市场监督管理局 发布

DB15/T4195—2025

DB15/T4195—2025

前 言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件由内蒙古自治区农牧厅提出。

本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会（SAM/TC19）归口。

本文件起草单位：内蒙古自治区动物疫病预防控制中心、金宇保灵生物药品有限公司、呼伦贝尔市动物疫病预防控制中心、阿拉善盟动物疫病预防控制中心、鄂尔多斯市动物疫病预防控制中心、巴彦淖尔市动物疫病预防控制中心。

本文件主要起草人：郭宇、王旭红、王建龙、萨茹拉、张璇、刘然、特木尔巴根、狄栋栋、苏胜杰、武琥琮、王巍、郭少平、杨波、刘海成、郭文。

I

DB15/T4195—2025

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牛结节性皮肤病采样技术规范

范围

本文件规定了牛结节性皮肤病样品采集、保存、运输及废弃物处置等技术规范和要求。

本文件适用于牛结节性皮肤病的检测、诊断、监测、免疫效果评价等兽医实验室样品采集工作。

规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB19489 实验室生物安全通用要求

术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

样品 specimen

取自牛或环境，拟通过检验反映牛个体、群体或环境有关状况的材料或物品。

采样 sampling

按照规定的程序和要求从牛或周围环境取得一定量样本，并经过处理作为检测用样品的过程。

灭菌 sterilization

采用物理或化学方法杀灭或清除所有微生物的方法。

废弃物 hazardouswaste

有潜在生物危险、可燃、易燃、腐蚀、有毒和有感染风险的对人、环境有害的一切废弃物。

采样前准备

采样器材

1

器械：解剖刀、手术剪刀、镊子、采血器、针头。

容器：真空采血管（含EDTA或肝素钠抗凝剂）、离心管（1.5mL、2mL）、样品保存管、样品保存盒（袋）。

其他：医用棉签、75%酒精棉球、碘酊棉球、封口膜、冰袋、试管架、样品运输箱。

防护用品

一次性口罩、防护服、手套、鞋套、护目镜、面罩。

记录用品

中性笔、记号笔、防水标签纸、采样表等。

样品保存液

0.1mol/LPBS(pH7.4)缓冲液，配制方法见附录A中的A.1。

10%甘油-PBS缓冲液，配制方法见附录A中的A.2。

样品的采集与处理

基本原则

病毒分离和核酸检测时，优先采集皮肤结节（痂皮）、淋巴结、肺、脾等组织上的病变结节及周围组织和口鼻拭子等样品，在牛急性感染期可采集抗凝血进行检测；抗体检测时，优先采集血清样品。

样品采集、前处理、制备时要做好个人生物安全防护，避免交叉污染，具体按照GB19489的规定执行。

解剖刀、手术剪刀、镊子使用前应经121℃高压蒸汽或煮沸30min灭菌处理，临用时可用75%

酒精擦拭或经火焰灭菌处理。

采样后的废弃物等按照《医疗废物管理条例》进行无害化处理。

血样

血样的采集

采血前准备

采血前应对采血部位的皮肤剃毛，用1%～2%碘酊消毒后，再用75%的酒精棉球由内向外螺旋式脱碘消毒，干燥后采血。采血时可用采血器或真空采血管。

尾静脉采血

将牛尾提起，在离尾根大约10cm中间凹陷处，垂直刺入采血器针头约1cm，见有回流血液时，随即向外拉针芯使血液流入采血器或接入真空采血管，采血后立即用棉球按压止血，止血后用碘伏棉球对采血部位消毒。

颈静脉采血

在采血部位下方用手压迫颈静脉血管，使其怒张后使针头与皮肤呈45°角由下向上方刺入血管，见血液回流时，随即向外拉针芯使血液流入采血器或接入真空采血管，采血后立即用棉球按压止血，止血后用75%的酒精棉球对采血部位消毒。

2

血样的处理

全血样品

采集不少于3mL的血液样品到含EDTA或肝素钠抗凝剂的真空采血管中，采血后要轻轻上下颠倒，使抗凝剂与血液充分混合。

血清样品

采集不少于5mL的血液样品，将装有血液的采血器在室温下静置2h～4h，待血液凝固析出血清后置于4℃冰箱过夜，用移液器