中科院大学 分子生物学研究技术第7章外源基因表达调控.pdfVIP

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第六章外源基因在受体细胞

内的表达调控

引言

表达调控的研究内容

外源基因在不同水平上的表达调控

整合位置效应(positioneffect)

D

整合状态

拷贝数影响(copiesnumbers)

N

ADNA再分布(DNArearrange)

水基因活性DNA甲基化(DNAmethylation)

平共抑制和反式失活(cosuppressiontrans-inactivity)

启动子活性(promoter)

转录效率

R

调增强子(enhancer)

控NPoly(A)信号(signal)

水A转录加工内含子(intron)剪切

平水不稳定因子内含子-1

mRNA稳定性隐含内含子序列

隐含Poly(A)信号

起始密码边周序列(initialcode)

蛋翻译效率翻译增强因子(Ω)

白糖基化密码剂量效应(codonbias)

翻译后修饰叶绿体

水蛋白质运输信号肽线粒体

第六章外源基因在受体细胞

内的表达调控

一.转化外源基因的瞬时表达和稳定表达

1.瞬时表达

概念过程

2.瞬时表达的机理

a.瞬时表达是没有整合的外源基因的表达

b.瞬时表达是一种正常的表达方式

3.外源基因瞬时表达的影响因素

(1)质粒DNA的结构

(2)内源核酸酶的影响

(3)受体细胞生理状态

(4)内源GUS酶抑制剂

4.外源基因瞬时表达的应用

(1)在基因转化研究中的应用

a.农杆菌转化能力的检测

b.优化基因转化条件

(2)基因表达调控的研究

5.外源基因的稳定表达

外源基因在受体细胞中的稳定表达的条件

a.时间长

b.无迅速衰退现象

c.分子杂交证明DNA已经整合到基因组中

d.能遗传,并符合分离规律

第六章外源基因在受体细胞

内的表达调控

一.转化外源基因的瞬时表达和稳定表达

二.转化外源基因的同源性和异源性表达

异源性表达(heterologousexpression)

同源性表达(h

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