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2025年pcr核酸考试题及答案

一、单项选择题

1.PCR技术的发明者是（）

A.穆里斯

B.桑格

C.吉尔伯特

D.马克斯·佩鲁茨

答案：A

2.PCR反应中，延伸温度一般为（）

A.55℃

B.60℃

C.72℃

D.80℃

答案：C

3.核酸提取过程中，常用的蛋白酶K的作用是（）

A.水解蛋白质

B.水解核酸

C.促进核酸溶解

D.抑制核酸降解

答案：A

4.下列哪种物质不是PCR反应体系的成分（）

A.dNTP

B.Taq酶

C.引物

D.葡萄糖

答案：D

5.核酸检测中，Ct值的含义是（）

A.循环阈值

B.扩增曲线拐点处的循环数

C.荧光信号达到设定阈值时所经历的循环数

D.以上都是

答案：D

6.用于PCR反应的缓冲液中，通常含有（）

A.Tris-HCl

B.KCl

C.MgCl2

D.以上都是

答案：D

7.核酸提取时，酚氯仿抽提的原理是利用（）

A.核酸与蛋白质的溶解性差异

B.核酸与有机溶剂的亲和性

C.核酸的电荷性质

D.核酸的分子大小

答案：A

8.以下哪种引物设计原则是错误的（）

A.引物长度一般为15-30bp

B.引物GC含量在40%-60%

C.引物自身不能有连续4个碱基互补

D.引物3端可以是任意碱基

答案：D

9.PCR反应中，变性温度一般为（）

A.90℃

B.94℃

C.98℃

D.100℃

答案：B

10.核酸检测结果为阳性，其Ct值通常（）

A.较大

B.较小

C.与阴性结果Ct值无差异

D.无法判断

答案：B

二、多项选择题

1.PCR反应体系的基本成分包括（）

A.模板DNA

B.引物

C.dNTP

D.Taq酶

E.缓冲液

答案：ABCDE

2.核酸提取的方法有（）

A.酚氯仿抽提法

B.磁珠法

C.离心柱法

D.煮沸法

E.化学裂解法

答案：ABCDE

3.影响PCR反应的因素有（）

A.模板质量

B.引物质量

C.dNTP浓度

D.Taq酶活性

E.反应温度

答案：ABCDE

4.核酸检测的临床应用包括（）

A.病原体检测

B.肿瘤诊断

C.遗传疾病诊断

D.药物疗效监测

E.器官移植监测

答案：ABCDE

5.以下属于PCR技术衍生技术的有（）

A.RT-PCR

B.qPCR

C.巢式PCR

D.多重PCR

E.原位PCR

答案：ABCDE

6.核酸提取过程中，可能用到的试剂有（）

A.裂解液

B.蛋白酶K

C.酚

D.氯仿

E.异丙醇

答案：ABCDE

7.引物设计时需要考虑的因素有（）

A.长度

B.GC含量

C.特异性

D.3端碱基

E.二级结构

答案：ABCDE

8.PCR反应的循环参数包括（）

A.变性温度

B.变性时间

C.退火温度

D.退火时间

E.延伸时间

答案：ABCDE

9.核酸检测实验室质量控制的内容包括（）

A.人员培训

B.仪器设备校准

C.试剂质量控制

D.环境监测

E.室内质量控制

答案：ABCDE

10.核酸检测结果的影响因素有（）

A.采样方法

B.样本保存

C.检测方法

D.操作人员

E.仪器设备

答案：ABCDE

三、判断题

1.PCR技术只能扩增DNA，不能扩增RNA。（）

答案：错误

2.核酸提取过程中，离心速度越高越好。（）

答案：错误

3.引物的Tm值越高，特异性越好。（）

答案：正确

4.PCR反应中，dNTP浓度越高越好。（）

答案：错误

5.核酸检测结果阳性一定代表感染了病原体。（）

答案：错误

6.巢式PCR可以提高检测的特异性。（）

答案：正确

7.核酸提取后应尽快进行检测，否则核酸会降解。（）

答案：正确

8.多重PCR可以同时扩增多个靶基因。（）

答案：正确

9.PCR反应体系中，模板DNA的量越多越好。（）

答案：错误

10.核酸检测实验室不需要进行通风换气。（）

答案：错误

四、简答题

1.简述PCR技术的基本原理。

PCR技术是在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的条件下，依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应。以拟扩增的DNA分子为模板，以一对分别与模板5末端和3末端相互补的寡核苷酸片段为引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留复制的机制沿着模板链延伸直至完成新的DNA合成，反复重复这一过程，即可使目的DNA片段得到扩增。

2.核酸提取的基本步骤有哪些？

首先是样本的采集与处理，然后加入裂解液使细胞破碎释放核酸，接着用蛋白酶K水解蛋白质，再通