全自动WB技术分析技术（Wes）原理及应用.pptxVIP

?2024Bio-Techne?.Allrightsreserved.|1全自动DigitalWB技术原理及应用

总部：美国硅谷六家创新蛋白质研究公司组成CellBiosciencesAlphaInnotechConvergentBioscienceBrightwellTechnologiesZephyrusCyVek2011年7月更名ProteinSimple2014年Bio-Techne(NASDAQ:TECH)ProteinSimple?2023Bio-Techne?.Allrightsreserved.

MFI蛋白团聚体颗粒成像全自动分子量和/或电荷分析蛋白捕获免疫检测全自动多因子分析超灵敏微流控ELISA单细胞级别Western种群分析Imaging紫外-可见-红外凝胶成像和化学发光成像Maurice全自动全柱成像cIEFCE-SDS光吸收和自发荧 光检测iCE-3全柱成像cIEF光吸收检测SingleCellWesternMiloSimplePlexEllaSimpleWesternWes,JessandtheSuesiCE纯化的蛋白质5100/5200非纯化蛋白质(裂解物等)细胞?2023Bio-Techne?.Allrightsreserved.

?2023Bio-Techne?.Allrightsreserved.Wes（化学发光）SW-Size（基于MW分离毛细管电泳）全自动WB技术（SimpleWesternSize）原理、操作及应用

传统 Western Blot--More steps,more errorsPrecisionandvariancecomponentsinquantitativegelelectrophoresisElectrophoresis2005,26,2470–2475RocheCV35%重复性差About5ug- 20ugtotal protein需要大量样本大，小分子量蛋白12-24hours周期长定量效果差Day1传统WB常遇到的问题：?2023Bio-Techne?.Allrightsreserved.

定量+超微量样品+自动化GEL-RUNNING AUTOTRANSFER-FREEBLOT-FREEHANDS-FREE?2023Bio-Techne?.Allrightsreserved.Meet Simple Western!

Simple Western Size吸取样品蛋白分离蛋白固定抗体杂交定量检测400nl毛细管微量样品宽分子量范围（2-440KD） 全膜定量效果总蛋白归一化标准化，数据可追溯跑胶→“转膜”→抗体杂交→成像检测→分析，一键自动?2023Bio-Techne?.Allrightsreserved.

Meet Wes123Wes工作原理Wes特点Wes实验操作简介Wes?2023Bio-Techne?.Allrightsreserved.

Wes工作原理所有在毛细管内的步骤都自动完成!与传统Western不同:无需制胶（液态胶）无需转膜（紫外激活交联）无需人工孵育/清洗/压片无需人工成像拍照蛋白上样蛋白分离蛋白固定免疫杂交数据采集基于毛细管电泳的免疫学分析?2023Bio-Techne?.Allrightsreserved.

您所需要做的工作配制样品和试剂加样混匀加热运行放毛细管卡盒放加样板运行程序加样加marker加样品加封闭液加一抗加二抗加发光液加洗液?2023Bio-Techne?.Allrightsreserved.

三种结果展现形式泳道图成像图峰形图分子量上大下小?2023Bio-Techne?.Allrightsreserved.毛细管实际曝光图峰面积为化学发光信号值自动获得条带化学发光信号值

数字化Western2.ElectropherogramView3.MoreRichInformationPeakAreaPeakHeight1.LaneView MoreDetailPeakAreaS/NBaseline?2023Bio-Techne?.Allrightsreserved.

Wes工作原理?2023Bio-Techne?.Allrightsreserved.

1. Wes – 重现性好CV35%CV=9%Rustandi,R.R.,etal(2012).QualitativeandquantitativeevaluationofSimon,anew