DB51T 1185-2025 桑蚕微粒子病诊断防控技术规程.docxVIP

ICS65.020.30CCSB47

ICS65.020.30

CCSB47

四 川 省 地 方 标 准

DB51/T1185—2025

代替DB51/T844—2008，DB51/T1185—2011

桑蚕微粒子病诊断防控技术规程

2025-09-15发布 2025-10-15实施

四川省市场监督管理局 发布

DB51/T1185

DB51/T1185—2025

I

I

目 次

前言 II

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4诊断技术 1

5防控技术 5

附录A（资料性）微粒子孢子图 10

附录B（资料性）DNA普通提取法 11

附录C（资料性）荧光定量PCR产物相关信息 12

附录D（资料性）阳性质粒的制备 13

DB51/T1185

DB51/T1185—2025

II

II

前 言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件代替DB51/T844—2008《桑蚕微粒子病防治技术规程》和DB51/T1185—2011《桑蚕微粒子病诊断技术规程》。与DB51/T844—2008和DB51/T1185—2011相比，除结构性调整和编辑性改动外，主要技术变化如下：

——增加了桑叶全程消毒技术（见5.2.5）。

——增加了实时荧光定量PCR检测法（见4.2）。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由四川省农业农村厅提出、归口、解释并组织实施。

本文件起草单位：四川省蚕业管理总站、西南大学、四川省农业科学院蚕业研究所。

本文件主要起草人：吴钢、马露芸、潘敏慧、青学刚、董战旗、王琳璐、杨炯、李文学、魏卓娅、王晶晶。

DB51/T844—2008和DB51/T1185—2011的历次版本发布情况为：

——DB51/T844于2008年首次发布；DB51/T1185于2011年首次发布。

——本次为第一次修订。

DB51/T1185

DB51/T1185—2025

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桑蚕微粒子病诊断防控技术规程

范围

本文件规定了桑蚕微粒子病诊断和防控技术要求，确立了常规诊断及实时荧光定量PCR检测的流程和方法，描述了防控的关键环节及防控内容。

本文件适用于四川省桑蚕微粒子病的诊断和防控。

规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法NY/T1027桑园用药技术规程

DB51/T848养蚕消毒技术规程DB51/T1187桑蚕原蚕基地建设规范

术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

桑蚕微粒子病 pebrineforsilkworm(Bombyxmori)

由桑蚕微孢子虫（NosemabombycisNaegeli）感染引起的蚕病。

3.2

补正检查 correctiveinspectionforpebrine

从母蛾检疫合格的原蚕种中，逐卵圈抽取少量蚕卵置于温度（29±0.5）℃、相对湿度大于等于85%

的条件下催青，对孵化蚁蚕及卵壳、死卵，或原蚕种正常收蚁后的催青死卵、尾蚁、卵壳等，进行微粒子病检查。

3.3

预知检查 predictiveinspectionforpebrine

从饲养到制种全过程，对幼虫、蛹、成虫，蚕粪、熟蚕尿、蛾尿等排泄物，蜕皮壳、蛹壳、鳞毛等脱出物等抽样，进行微粒子病检查。

诊断技术

常规诊断

主要仪器设备

包括：

DB51/T1185

DB51/T1185—2025

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——普通光学显微镜、相衬（相差）显微镜，放大倍数16倍×40倍；

——生化培养箱，温度范围10℃～50℃，湿度范围50%～95%；

——普通冰箱，温度为0℃～4℃、-20℃；

——电子天平，精度0.001g；

——离心机，转速0r/min～3000r/min。

试剂

包括：

——氢氧化钾溶液[w(KOH)=2％]；

——浓盐酸[w(HCl)=30％];

——过氧化氢溶液[w(H2O2)=10％]；

——乙醇溶液[w(CH3CH2OH)=75％]；

——无菌水；

——分析用水按GB/T6682规定执行。

耗材

包括：

——解剖剪、镊子、橡皮吸管；

——研钵、研磨棒；

——样品袋、离心管（1.8mL、5mL）；

——容量