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病理科组织冷冻取材操作规范

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目录

CATALOGUE

02

取材操作步骤

03

质量控制要求

04

安全与防护措施

05

设备维护管理

06

文档与报告规范

01

准备阶段规范

01

准备阶段规范

PART

设备检查与调试

紧急备用电源检测

验证UPS电源在断电情况下可维持设备运行至少30分钟，保障关键性操作不中断。

辅助设备联动测试

检查组织包埋剂冷冻速度、冷台平整度及真空吸附装置密封性，避免因设备故障导致样本结构破坏。

冷冻切片机性能验证

确保冷冻切片机温度控制系统、刀片锋利度及防冻液循环功能正常运转，定期校准温度传感器误差范围不超过±1℃。

样本接收与标识确认

双人核对制度

接收样本时需由两名技术人员同步核对申请单编号、患者信息及样本部位，使用条形码扫描仪录入信息系统并生成电子追溯链。

每日操作前检测HEPA过滤器风速（≥0.38m/s）、压差及紫外线强度，确保气溶胶污染风险可控。

生物安全柜动态监测

检查液氮储存罐压力阀、通风报警装置及地面防滑处理，配备应急喷淋设备和氧浓度监测仪。

冷冻剂泄漏防护系统

设置锐器专用容器、甲醛中和桶及生物危害袋三重隔离系统，实现污染废弃物100%封闭转运。

医疗废物分类管理

环境清洁与安全评估

02

取材操作步骤

PART

组织固定与处理

采用中性缓冲福尔马林作为标准固定液，浓度严格控制在4%-10%之间，确保组织细胞结构完整性与抗原保存效果。针对特殊组织（如脂肪或神经组织）需调整固定液渗透压与作用时间。

固定液选择与配比

取材时需使用锋利刀片沿组织长轴平行切割，厚度不超过3mm，避免挤压或撕裂造成人工假象。对微小标本（如穿刺活检）需标记方位并单独包埋。

组织修整规范

梯度乙醇脱水需从低浓度（70%）逐步过渡至高浓度（无水乙醇），二甲苯透明时间控制在20分钟内，防止组织过度硬化影响后续切片质量。

脱水与透明化流程

冷冻切块技术要点

冷冻温度精准调控

冷冻台温度需维持在-20℃至-25℃区间，脂肪组织需调至-30℃以下。快速冷冻时避免直接接触液氮导致冰晶形成，可采用OCT包埋剂梯度降温法。

包埋方向与支撑物使用

组织包埋需确保最大切面朝下，复杂结构（如管腔器官）需添加支撑滤纸或海绵。肌肉组织应沿纤维走向包埋以减少断裂风险。

防污染与交叉处理

每例取材后需彻底清洁冷冻台面及器械，使用一次性刀片或严格消毒的金属刀片，避免组织残留导致诊断误差。

切片厚度控制标准

常规组织切片参数

绝大多数组织切片厚度设定为4-6μm，淋巴造血系统肿瘤需3-4μm薄切片以观察细胞细节，骨组织可增至8-10μm避免碎裂。

特殊染色适应性调整

免疫组化切片建议3-5μm以优化抗体渗透，脂肪染色需6-8μm增强脂滴显色效果。冰冻切片用于分子检测时需保证厚度一致性（±0.5μm公差）。

质量控制与校准

每日开机后需用标准厚度校准块验证切片机精度，每批切片随机抽查5张测量实际厚度，偏差超过10%需立即停机检修并追溯前10例标本。

03

质量控制要求

PART

切片质量评估方法

切片厚度均匀性检查

使用显微镜观察切片厚度是否一致，避免因厚度不均导致诊断误差，确保切片整体质量符合病理诊断标准。

组织完整性评估

检查切片中组织是否完整无缺损，边缘是否清晰，避免因取材或切片过程中组织损伤影响病理结果准确性。

无皱褶与气泡检测

确保切片表面平整无皱褶，封片时无气泡残留，以免干扰显微镜下观察和诊断。

染色对比度与清晰度

评估切片染色后的对比度和细胞结构清晰度，确保染色效果能够清晰显示组织形态和病变特征。

定期对不同批次的染色切片进行比对，确保染色试剂和操作流程的一致性，避免因批次差异导致染色结果不稳定。

每批次染色需设置阳性和阴性对照，验证染色试剂的敏感性和特异性，确保染色结果的可靠性。

检查切片染色是否均匀，避免局部过染或欠染现象，确保染色结果能够准确反映组织病理变化。

定期对自动化染色设备进行校准和维护，确保设备运行稳定，染色结果符合质量控制标准。

染色一致性检查

染色批次间比对

阳性与阴性对照设置

染色均匀性检测

自动化染色设备校准

严格登记每批次染色试剂的名称、批号和有效期，确保试剂来源可查，避免使用过期或不合格试剂。

染色试剂批号登记

每项操作步骤需由操作人员签名确认，明确责任归属，保证操作过程的规范性和可追溯性。

操作人员签名确认

01

02

03

04

详细记录每例标本的取材位置、切片厚度和数量，确保操作过程可追溯，便于后续复核和质量控制。

取材与切片记录

对操作过程中出现的异常情况（如组织破损、染色异常等）进行详细记录，并注明处理措施和结果，确保问题及时解决。

异常情况记录与处理

操作记录完整性

04

安全与防护措施

PART

个人防护装备使用

防护服与手套选择

操作人员需穿戴一次性无粉乳胶手套及防水