培养基的灭菌.pptVIP

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温度上升,灭菌速率常数增加的倍数大于培养基成分破坏的速率常数倍数。将温度提高到一定程度,会加速细菌孢子的死灭速度,缩短灭菌时间,由于有效成分的E’很低,温度的提高只能稍微增大其破坏速度,但由于灭菌时间的显著缩短,有效成分的破坏反而减少.因此,培养基灭菌宜采用“高温短时间”灭菌。第二节湿热灭菌的理论基础第30页,共56页,星期日,2025年,2月5日1/TlnK第二节湿热灭菌的理论基础第31页,共56页,星期日,2025年,2月5日灭菌时温度从T1T2时:第二节湿热灭菌的理论基础第32页,共56页,星期日,2025年,2月5日杀灭细菌芽孢的活化能E大于维生素等营养物质破坏的活化能E`(即EE`)第二节湿热灭菌的理论基础第33页,共56页,星期日,2025年,2月5日ΔEBS=67000×4.184(J/mol)ΔEVB=22000×4.184(J/mol)将灭菌温度从105?C提高到127?CKVB从0.02(min-1)提高到0.06(min-1)KBS从0.12(min-1)提高到40.0(min-1)嗜热脂肪芽孢杆菌孢子和维生素B1的lnK-1/T图第二节湿热灭菌的理论基础第34页,共56页,星期日,2025年,2月5日嗜热脂肪芽孢杆菌孢子死灭程度为N/N0=10-16时,灭菌温度对维生素B1破坏的影响灭菌温度(?C)达到灭菌程度的时间(min)维生素B1的损失(%)10084399.9911075891207.6271300.851101400.10731500.0151第二节湿热灭菌的理论基础第35页,共56页,星期日,2025年,2月5日第二节湿热灭菌的理论基础杀菌锅内灭菌培养基及物品灭菌所需压强0,098MPa,固体培养基维持20-30min,液体培养基维持15-20min,玻璃器皿及用具维持30-60min。种子罐、发醉罐、计量罐、补料镶等的空罐灭菌及管道灭菌通入蒸汽,使罐内蒸汽压强达0.147MPa,维持45min。灭菌过程中从阀门、边阀排出空气,并使蒸汽达到所有死角。灭菌完毕,关闭蒸汽后,待罐内压力低于空气过滤器压力时,通人无菌空气保持罐压0,098MPa第36页,共56页,星期日,2025年,2月5日空气总过滤器和分过滤器灭菌从过滤器上部通入蒸汽,并从上、下排气口排气,维持压强0.174MPa,灭菌完毕,通入压缩空气吹干。种子培养基实罐灭菌从夹层通人燕汽间接加热至80℃,再从取样管、进风管、接种管通人蒸汽直接加热同时关闭夹层蒸汽进口阀门,升温到121℃,维待30min,谷氨酸发酵的种子培养基实罐灭菌为110℃,维持l0min发酵培养基实罐灭菌从夹层或盘管进人蒸汽,间接加热至90℃,关闭夹层蒸汽,从取样管、进风管、放料管三路进蒸汽,直接加热至121℃,维持10min.谷氨酸发酵培养基实罐灭菌为105℃,维持25min。第二节湿热灭菌的理论基础第37页,共56页,星期日,2025年,2月5日发酵培养基连续灭菌一般培养基为130℃,维持5min。谷氨酸发酵培养基为115℃,维持6-8min。发酵罐需在培养基灭菌之前直接用蒸汽进行空罐灭菌。空消之后不能立即冷却,先用无菌空气保压,待灭菌的培养基输人罐内后,才可以开冷却系统进行冷却。油罐(消泡剂罐)灭菌一般条件为0.15--0.18MPa·维持60min。补料实罐灭菌视物料性质而定,如糖水为0.1MPa(120℃),保温30min;淀粉料液为121℃维持5min。尿素溶液灭菌常用灭菌条件为105℃,维持5min。第二节湿热灭菌的理论基础第38页,共56页,星期日,2025年,2月5日第三节培养基灭菌的工程设计一、无菌的标准根据微生物热死灭方程,要求灭菌后达到绝对无菌是很难做到的,也是不必要的。因此在工程设计中常取N=10-3第39页,共56页,星期日,2025年,2月5日二、分批灭菌1,分批灭菌的设计在发酵罐中进行实罐灭菌,是典型的分批灭菌。全过程包括升温、保温、降温三个过程第三节培养基灭菌的工程设计第40页,共56页,星期日,2025年,2月5日第1页,共56页,星期日,2025年,2月5日第一节培养基灭菌的目的、要求和方法第二节湿热灭菌的理论基础第三节培养基灭菌的工程设计第2页,共5

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