2025年专题二微生物的培养与应用知识点总结.doc

专题二微生物得培养与应用知识点

２、1微生物得试验室培养

１.培养基就是人们按照微生物对营养物质得不一样需求,配制出供其生长繁殖得营养基质,就是进行微生物培养得物质基础.

2、培养基按物理性质分为液体培养基(应用于工业或生活生产）、固体培养基（应用于微生物得分离与鉴定）与半固体培养基(常用于观测微生物得运动及菌种保藏等）。按成分分为合成培养基(用成分已知得化学物质配制而成,成分种类比例明确,用于微生物得分离鉴定）与天然培养基(用化学成分不明得天然物质配制而成,用于实际工业生产)。按用途分为选择培养基(加入某种化学物质,以克制不需要微生物生长,增进所需微生物得生长）与鉴别培养基（根据微生物得特点，加入某种指示剂或化学药物,来鉴别不一样类别得微生物)。

3、培养基得化学成分包括：水、无机盐、碳源、氮源与生长因子等。碳源包括CO2、NａHCO３等无机碳源与糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能运用有机碳源。单质碳不能作为碳源。氮源包括N2、NＨ3、NO３—、NH4＋等无机氮源与蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨等有机氮源。只有固氮微生物才能运用N2。

4、培养基还需满足pH、特殊营养物质与氧气得规定。例：培养乳酸杆菌需添加维生素;培养霉菌需将ｐH调至酸性;培养细菌需将pH调至中性或微碱性；培养厌氧型微生物需提供无氧得条件.

5、无菌操作技术包括:①对试验操作得空间、操作者得衣着与手，进行清洁与消毒.②将用于微生物培养得器皿、接种用品与培养基等器具进行灭菌。③为避免周围环境中微生物得污染,试验操作应在酒精灯火焰附近进行。④试验操作时应避免已经灭菌处理得材料用品与周围得物品相接触.

６、消毒与灭菌得区别就是:消毒指使用较为温与得物理或化学措施仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害得微生物（不包括芽孢与孢子），包括煮沸消毒法，巴氏消毒法(酒精、氯气、石炭酸）与紫外线消毒法。灭菌指使用强烈得理化原因杀死物体内外所有得微生物，包括芽孢与孢子,包括灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。

７、灭菌措施：①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法;②玻璃器皿、金属用品等使用干热灭菌法,所用器械就是干热灭菌箱;③培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法，所用器械就是高压蒸汽灭菌锅；④表面灭菌与空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械就是紫外灯。

8、制作牛肉膏蛋白胨固体培养基

（１)措施环节：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板.

（2）倒平板操作得环节包括:①将灭过菌得培养皿放在酒精灯火焰旁得桌面上,右手拿装有培养基得锥形瓶,左手拔出棉塞。②将锥形瓶得瓶口迅速通过火焰（灼烧灭菌，防止瓶口得微生物污染培养基）。③将培养皿打开一条稍不小于瓶口得缝隙，再将锥形瓶中得培养基（约1０～2０mL）倒入培养皿，立即盖上培养皿得皿盖.④等待平板冷却凝当然后，将平板倒过来放置,使培养皿盖在下、皿底在上(目得:使培养基表面得水分更好地挥发，又可以防止皿盖上得水珠落入培养基,导致污染）.

９、倒平板时若不慎将培养基溅在皿盖与皿底上,则这个平板不能用来培养微生物,原因就是空气中得微生物会在皿盖与皿底上生长.

1０、纯化大肠杆菌得原理就是:用平板划线法与稀释涂布平板法接种，使汇集在一起得微生物分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个得菌落（生态学上称种群)，以达纯化菌种得目得。

11、平板划线操作时第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环得原因就是:前者避免接种环上也许存在得微生物污染培养物，后者杀死上次划线残留在环上得菌种，使菌种逐渐变少以便得到单个菌落。在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环得原因就是及时杀死接种环上残留得菌种,避免细菌污染环境与感染操作者。在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线得原因就是避免接种环温度太高而杀死菌种。

12、涂布平板操作得环节包括：①将涂布器浸在盛有酒精得烧杯中.②取少许菌液，滴加到培养基表面.

③将沾有少许酒精得涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8~１０s。④用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面.

１３、菌种得保留：频繁使用,临时保留接种到固体斜面培养基，在４℃下保留。长期保留菌种用甘油管藏得措施。

2、2土壤中分解尿素得细菌得分离与计数

1、尿素就是重要得农业氮肥，不能直接被植物吸取.土壤中有一类细菌能合成脲酶，将尿素分解成氨,被植物吸取运用.尿素最初就是从人得尿液中发现得。

2、试验室中微生物筛选得原理就是：人为提供有助于目得菌株生长得条件(包括营养、温度、PH等），同步克制或制止其她微生物生长.

3、在微生物学中，将容许特定种类得微生物生长，同步克制或制止其她种类微生物生长得培养基，称作选择培养基。例如，培养基中不加入有机物可以选择培养自养微生物；培养基中不加入氮元素,可以选择培养能固氮得微生物;加入高浓度得食盐可选择培养