水产养殖技术专业单胞藻一级培养09课件.pptxVIP

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实验四单胞藻一级培养单细胞藻在适宜的生态条件下可以生长繁殖,在不同配方的培养液中生长效果不同,因此要根据各种单细胞藻的生理需求选择合适的生态环境和营养盐进行培养。一、实验目的掌握单细胞藻一级培养的基本操作与管理,从而有可能做到有计划地培养足够数量的符合质量的单细胞藻。二、实验原理和基础知识

三、实验用品：1、实验器材恒温干燥箱、250ml三角烧瓶、电炉、温度计、盐度计、3000m烧瓶、10m移液管、100m量筒、扎瓶口的牛皮纸、橡皮圈、长镊子剪刀、标签纸、(配制培养液用:电子天平、电炉、烧杯、搅拌棒、容量瓶、试剂瓶)2、药品固定液、宁波大学3号母液、洗液3、实验材料小球藻2◎ooml、扁藻200om、等边金藻2000ml、消毒海水

四、实验操作步骤1.培养容器、工具的消毒。各种玻璃器皿先用去污粉刷洗干净,再用洗液消毒、冲洗干净后,晾干,放入烘箱120℃消毒2h,待温度低于60℃后才能打开烘箱门取岀器皿(提前消毒)2.煮沸消毒海水。用脱脂棉过滤海水2000m1于三角烧瓶中,放至电炉烧开,自然冷却到室温(提前准备)

实验操作步骤4.接种前,先洗浄手,擦干后用75%的酒精棉球消毒。3.用漂白水消毒海水。取海水2000ml于三角瓶中,加入漂白水0.5ml(含有效氯10%),混均,盖上盖子,避免氯气逸出,消毒时间一般为下午5点至次日上午7点,请勿在上午配制和消毒,因光照会使氯气分解,影响消毒效果。培养液的还原一般采用消毒液量的10%(如含有效氯10%的漂白水,可加入100g克硫代硫酸钠还原),将称量好的硫代硫酸钠用开水溶解后倒入消毒海水中,摇晃使之彻底还原,1-2h后用淀粉碘化钾试纸测试是否有余氯,若无余氯即可接种(提前准备)。

5.在消毒海水中加入3号母液2ml,摇晃烧瓶,使营养盐扩散均匀并恢复原海水中气体溶解量6.用量筒分别量取80m1培养液,加入已消毒的三角烧瓶中再用移液管移取20m小球藻(或扁藻、金藻)藻种加入角烧瓶中。(一般先加培养液,后加藻种)实验操作步骤7.摇晃三角烧瓶,用消毒移液管取岀5皿1接种好的藻液,用于测定接种藻细胞浓度NO.8.将培养瓶置于适宜的光照和温度下进行培养管理,每天摇晃2-4次,观察微藻的生长情况并做好记录,一周后再次测定培养的藻细胞密度。

注意事项1.用洗液消毒后的瓶子不能再用刷子刷内壁,以免刷子带来污染物。2注意所有接触藻液的工具、容器都必须经过严格消毒。作业与思考1.培养结束后提交培养报告,描述单细胞藻的生长情况。2.在连续晴天条件下,单细胞藻在下午或次日早上突然下沉,请你解释原因并说明应采取的措施3比较煮沸消毒法与漂白水消毒法的培养效果

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