水产养殖技术专业单细胞培养液一母液的配制52课件.pptxVIP

单细胞培养液一母液的配制水产养殖技术专业教学资源库

实验四单细胞培养液一母液的配制单细胞藻大量生长繁殖,必须从环境中吸收各种营养元素,包括氮、磷、铁和微量元素等单细胞藻在不同配方的培养液中生长效果不同,因此要根据各种单细胞藻的生理需求选择合适的培养液把营养元素根据培养液配方进行髙浓度配合(而且稀释液用蒸馏水或去离子水),一般浓缩1000倍,配成母液。目的是培养方便,母液不能直接用于培养单细胞藻类,必须稀释后才用。一般每升消毒海水或淡水中加入1m母液,即为培养液一、实验目的掌握培养液配制的原理、一般方法和步骤,为今后成功培养单细胞藻打基础。二、实验原理和基础知识

三、实验用品：1、实验器材电子天平、电炉、容量瓶、烧杯、搅拌棒、试剂瓶、100m量筒、吸管l0ml移液管、耳球、微量注射器2、药品NaNO3、(NH2)2CO、KH2PO4、FeSO47H2O、MnSOEDTA-Na2、ⅤB1、VB12、Na2SiO3、实验材料蒸馏水

四、实验操作步骤1.“宁波大学3号”培养液配方(母液)NaNo3:100gFeso4.7H2O：2.5gKH2PO4：10gMnSO4：0.25gEDTA-Na2：20g VB1：60mgVB12：50ug蒸馏水1000ml◆培养海水绿藻类、金藻类、硅藻类等使用。在培养硅藻时在此基础上加入0.02g/LNa2sio3,培养螺旋藻时应加29/L的NaHco3。

配制步骤(2)压紧容量瓶盖,将容量瓶上下颠倒n次,使其混合均匀,倒进经消毒的试剂瓶内,并贴上标签(母液名称、配制人、日期)。（1）称量和溶解配制母液100ml。按配方先称取NaNo3放入干净的烧杯中,加入约60ml蒸馏水,搅拌使NaNo3完全溶化。然后再依次称取其他各成分,逐一溶解,最后一起倒入100ml容量瓶,再用蒸馏水冲洗烧杯2-3次,并转移到容量瓶中,最后用蒸馏水加至刻度。(在本配方中FeSO4、Mnso4应与EDTA-Na2一起加热溶解)（3）配制0.5%Na2Sio3称05gNa2Sio3置于干净的烧杯中,加入约60ml蒸馏水,搅拌溶解,倒进100ml容量瓶,用蒸馏水冲洗烧杯2-3次并转移至容量瓶中,定容100ml。上下颠倒容量瓶n次使其混合均匀,倒进经消毒的试剂瓶内,并贴上标签(贮液名称、浓度、配制人、日期)

配制母液应注意事项1各种营养盐应逐一称量、逐一溶解,倒进容量瓶定容,然后再倒入试剂瓶保存。2.稀释液必须加蒸馏水或去离子水3.难溶解的物质必须与EDTA-Na2一起络合加热溶解4待温度冷却至低于60℃时,才能加入维生素,以免失效。5注意加入烧杯中溶化营养盐的水量应少于所需要定容的水【作业与思考】1.单细胞藻类培养液配制的操作过程中应注意什么问题?2.单细胞藻类的全培养液配方应包含哪些成分?3.试述该配方中的N、P比是多少?

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