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Bt棉生殖器官杀虫蛋白表达特征及高温胁迫下的响应机制研究

一、引言

1.1Bt棉的发展历程与应用现状

自20世纪80年代起，转基因技术迅猛发展，Bt棉作为转基因作物的典型代表应运而生。1987年，比利时科学家成功培育出第一个转Bt基因烟草，这为Bt棉的研发奠定了基础。1988年，孟山都公司利用Bt基因获得第一批转基因抗虫棉，并于1995年在美国和加拿大实现商品化种植。此后，Bt棉在全球范围内迅速推广。

在中国，Bt棉的研究与应用也取得了显著成就。1997年，中国正式引进Bt棉，经过多年的研发和推广，目前Bt棉种植面积已占棉花总种植面积的90%以上。印度也是Bt棉的主要种植国家之一，自2002年引入Bt棉后，种植面积不断扩大，成为全球最大的Bt棉种植国之一。据国际农业生物技术应用服务组织（ISAAA）统计数据显示，2022年全球Bt棉种植面积达到了2500万公顷，约占全球棉花种植总面积的69%。

Bt棉的广泛应用有效控制了棉铃虫等鳞翅目害虫的危害，显著减少了化学农药的使用量，降低了生产成本，提高了棉花产量和品质，对农业可持续发展做出了重要贡献。

1.2Bt棉抗虫原理与杀虫蛋白

Bt棉的抗虫特性源于其体内转入的苏云金芽孢杆菌（Bacillusthuringiensis，简称Bt）基因。苏云金芽孢杆菌在生长过程中会产生一种伴孢晶体蛋白，即Bt杀虫蛋白。这种蛋白本身无毒，以原毒素形式存在。当棉铃虫等害虫取食Bt棉后，Bt原毒素在害虫肠道内的碱性环境和特定蛋白酶的作用下，被水解成具有活性的毒性多肽分子。

这些毒性多肽分子能够与害虫肠道上皮细胞表面的特异受体结合，改变细胞膜的通透性，导致细胞膜穿孔甚至裂解，细胞内物质外泄，最终使害虫停止取食并死亡。Bt蛋白对鳞翅目、鞘翅目、双翅目等10个目的500多种昆虫均有特异性毒性，但对蜜蜂（膜翅目）、蝉（半翅目）等其他昆虫以及人、哺乳动物和家禽等无毒性，具有高度的安全性和特异性。

1.3研究Bt棉生殖器官杀虫蛋白表达的重要性

棉花的生殖器官包括花、蕾、铃等，是棉花产量形成的关键部位，也是棉铃虫等害虫的主要侵害目标。生殖器官中杀虫蛋白的表达量直接影响棉花对害虫的抗性水平。如果生殖器官中杀虫蛋白表达量不足，害虫就可能在这些部位大量取食，导致蕾铃脱落、棉铃发育不良等问题，从而严重影响棉花的产量和品质。

研究Bt棉生殖器官杀虫蛋白表达特征，有助于深入了解Bt棉抗虫性的时空变化规律，为制定科学合理的害虫防治策略提供依据。明确不同生育期生殖器官杀虫蛋白的表达差异，可以在害虫高发期针对性地加强防治措施，提高防治效果。同时，这也有助于筛选和培育在生殖器官中高表达杀虫蛋白的Bt棉新品种，进一步提升棉花的抗虫能力和产量潜力。

1.4高温对农作物生长发育的影响概述

随着全球气候变暖，高温胁迫已成为影响农作物生长发育和产量的重要环境因素之一。高温会对农作物的生理生化过程产生广泛而深刻的影响。在光合作用方面，高温会导致植物叶片气孔关闭，二氧化碳吸收受阻，同时光合作用酶的活性受到抑制，使光合作用速率下降，影响作物的碳水化合物合成和积累。

在呼吸作用方面，高温会使呼吸作用增强，导致作物消耗过多的能量，影响其正常生长和发育。高温还会加剧作物的蒸腾作用，使水分散失过快，造成作物缺水，影响水分代谢和养分运输。此外，高温还会影响农作物的激素平衡、细胞结构和功能，导致作物生长发育异常，如植株矮小、叶片发黄、花期提前或延迟、结实率降低等。

对于开花结果类的农作物，高温会使雌花和雄花的比例失衡，影响授粉受精过程，导致瓜果类作物出现畸形果、小果、落果，禾谷类作物出现空秕率增加等现象。高温还会加速病虫害的繁殖和传播，降低作物的抵抗力，使农作物更容易受到病虫害的侵袭。

1.5研究目的与意义

本研究旨在深入探究Bt棉生殖器官杀虫蛋白表达量的特征，明确其在不同生育期、不同环境条件下的变化规律。同时，研究高温对Bt棉生殖器官杀虫蛋白表达的影响，揭示高温胁迫下Bt棉抗虫性变化的生理机制。

通过本研究，可为Bt棉的种植管理提供科学依据。根据生殖器官杀虫蛋白表达特征，合理安排种植时间、优化栽培措施，以提高Bt棉的抗虫性和产量稳定性。在高温频发的地区和季节，采取有效的调控措施，减轻高温对Bt棉抗虫性的影响，保障棉花生产的可持续发展。本研究还将为Bt棉新品种的选育提供理论指导，有助于培育出在高温环境下仍能保持高抗虫性的棉花品种，推动棉花产业的发展。

二、Bt棉生殖器官杀虫蛋白表达量特征

2.1不同生育期生殖器官杀虫蛋白表达变化

2.1.1现蕾期

在现蕾期，棉蕾是棉花生长发育的关键生殖器官，也是棉铃