第二章培养基灭菌.pptVIP

4、污染菌的热死特性要了解是否符合对数残留定律，确定K，A，E的值。对不同细胞，选取不同的T和t。5、培养罐中温度与时间的关系大量培养液分批灭菌时，加热和冷却时间不能忽略。总灭菌时间等于升温、保温和降温三段时间之和。t=t1+t2+t3第61页，共96页，星期日，2025年，2月5日三、灭菌效率的计算若灭菌温度恒定为T，那么到规定灭菌度（N）所需杀菌时间当灭菌℃随时间变化时，K也变化，则有积分第62页，共96页，星期日，2025年，2月5日用V表示灭菌效果，则有V总＝ln(N0/NS)=V加+V保+V冷升温、维持和冷却过程中灭菌效果分别为V加V保V冷加热和冷却后积分，简化得公式，P146页第63页，共96页，星期日，2025年，2月5日例如：某发酵罐分批灭菌最高温度120℃，保持5min，设计的温度和时间关系如下：发酵罐100m3，N0=105个/ml，N=10-3，已知升温和冷却的灭菌效果不超过总灭菌效果的25%，问设计的T-t过程是否达到灭菌要求，如不能，应如何改进？（A=7.94×1038min-1；△E=278441J/mol;R=8.28J/mol·K）实际生产上，培养基直接蒸汽加热和间接冷却的计算。P12第64页，共96页，星期日，2025年，2月5日工业规模的灭菌操作，完成整个灭菌周期的时间是3~5h，各阶段的贡献大致如下：V加/V总=0.2V保/V总=0.75V冷/V总=0.05四、分批灭菌的讨论第65页，共96页，星期日，2025年，2月5日温度和压力的关系泡沫问题投料过程中，麸皮和豆饼粉等固形物在罐壁上残留的问题灭菌结束后应立即引入无菌空气保压培养基间歇灭菌过程中应注意的问题第66页，共96页，星期日，2025年，2月5日一、连续灭菌概念二、连续灭菌流程三、连续灭菌计算四.连续灭菌反应器的流体流动模型第四节连续灭菌及其计算第67页，共96页，星期日，2025年，2月5日连续灭菌的工作原理连续灭菌的工艺流程连续灭菌时间的计算连续灭菌反应器设备及计算本节知识点：重点：连续灭菌的工艺流程、设备及计算难点：连续灭菌计算及应用第68页，共96页，星期日，2025年，2月5日灭菌设备?

l、高压蒸汽灭菌??生产中使用高压蒸汽灭菌锅的型号很多手提式灭菌锅，容量小，多用于某种培养基灭菌。立式或卧式灭菌锅较大，多用于原种或少量栽培种培养基的灭菌，一般能装几十瓶或几百瓶。灭菌柜要和蒸汽锅炉配套，用于大量的原种和栽培种培养基的灭菌，一次能装几百至几千瓶(袋)。但投资太大，适合大型菌种场使用。

第29页，共96页，星期日，2025年，2月5日立式灭菌锅第30页，共96页，星期日，2025年，2月5日2、常压蒸汽灭菌锅???常压蒸汽灭菌锅是用铁锅、砖、水泥砌成的，造价低，适于一般生产单位和专业户使用。大小可根据需要而定，但最大的锅每次装料也最好不超过500公斤。3、烘箱??烘箱主要是用于玻璃器皿的干燥和灭菌，也可用于其它物品烘干。第31页，共96页，星期日，2025年，2月5日三、培养基灭菌的要求培养基灭菌程度：因发酵系统而不同（1）达到要求的无菌程度（即可以接受的范围）（2）尽量减少营养成分的破坏，在灭菌过程中，培养基组分的破坏，是由两个基本类型的反应引起的：培养基中不同营养成分间的相互作用；对热不稳定的组分如氨基酸和维生素等的分解。培养基灭菌需解决的问题：灭菌的温度灭菌的时间第32页，共96页，星期日，2025年，2月5日四、发酵工业培养基灭菌的特点数量多含有很多固体物质有利于生产菌的生长方便易行价格便宜培养基灭菌应采用高温蒸汽灭菌——湿热灭菌湿热灭菌的优点蒸汽来源容易，操作费用低，本身无毒；蒸汽有强的穿透力，灭菌易于彻底；蒸汽有很大的潜热；操作方便，易管理。第33页，共96页，星期日，2025年，2月5日培养基湿热灭菌需解决的工程问题将培养基中的杂菌总数N0杀灭到可以接受的总数N（10-3），需要多高的温度、多长的时间为合理。灭菌温度和时间的确定取决于：杂菌孢子的热死灭动力学反应器的形式和操作方式培养基中有效成分受热破坏的可接受范围第34页，共96页，星期日，2025年，2月5日第二节加热灭菌的基本原理一