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羧酸甜菜碱两性聚合物功能化尼龙导管：制备、特性及循环肿瘤细胞捕获效能研究

一、引言

1.1研究背景

肿瘤，作为严重威胁人类健康的重大疾病之一，其高死亡率和高复发率给患者和社会带来了沉重负担。据国际癌症研究机构（IARC）发布的数据显示，全球每年新增癌症病例数以千万计，死亡人数也在不断攀升。其中，肿瘤转移是导致患者死亡的主要原因，约90%的实体肿瘤患者死于肿瘤转移。肿瘤转移是一个复杂的多步骤过程，循环肿瘤细胞（CirculatingTumorCells，CTC）在其中扮演着关键角色。

CTC是指从原发肿瘤或转移灶脱落，进入血液循环系统的肿瘤细胞。这些细胞虽然数量稀少，在每毫升血液中仅有1-10个，但其存在却与肿瘤的转移、复发密切相关。临床研究表明，在多种癌症患者的血液中检测到CTC，如乳腺癌、结直肠癌、前列腺癌等，并且CTC的数量与患者的预后、无进展生存期和总生存期呈负相关。例如，对于转移性乳腺癌患者，7.5毫升血液中含有5个以上CTC的患者预后较差。因此，CTC的检测对于肿瘤的早期诊断、预后判断、疗效评估以及个体化治疗具有重要意义，是目前肿瘤研究领域的热点之一。

目前，临床上常用的CTC检测方法主要包括CellSearch系统、微流控芯片技术、免疫磁珠分离法等。CellSearch系统是美国FDA批准的唯一一种用于CTC临床检测的方法，它基于上皮细胞抗原（EpCAM）的磁珠捕获和染色，在荧光显微镜下对DAPI+/CK+/CD45-的细胞进行计数。然而，该方法存在一定的局限性，如对EpCAM阴性的肿瘤细胞捕获效率低，检测成本高，操作复杂等。微流控芯片技术虽然具有高通量、微型化、集成化等优点，但也面临着捕获效率有待提高、细胞损伤较大等问题。免疫磁珠分离法同样依赖于细胞表面标志物，对于标志物表达异质性的肿瘤细胞难以实现高效捕获。因此，开发一种高效、特异性强、操作简便的CTC捕获方法具有迫切的临床需求。

尼龙材料由于其良好的机械性能、化学稳定性和生物相容性，在生物医学领域得到了广泛应用，如制备医疗器械、药物载体等。通过对尼龙导管进行功能化修饰，使其表面具有特异性识别和捕获CTC的能力，为CTC的检测提供了一种新的思路。羧酸甜菜碱两性聚合物具有独特的分子结构，其同时含有正电荷和负电荷基团，在水溶液中能够形成类似“分子刷”的结构，表现出优异的抗蛋白质吸附性能和生物相容性。将羧酸甜菜碱两性聚合物修饰到尼龙导管表面，不仅可以改善尼龙导管的血液相容性，减少血栓形成，还可以为后续抗体的接枝提供良好的平台，有望实现对CTC的高效捕获。

1.2研究目的与意义

本研究旨在制备羧酸甜菜碱两性聚合物功能化尼龙导管，并探究其对循环肿瘤细胞的捕获性能。通过优化功能化修饰条件，提高尼龙导管对CTC的捕获效率和特异性，为肿瘤的早期诊断和个体化治疗提供一种新的技术手段。

具体而言，本研究的意义主要体现在以下几个方面：

临床诊断方面：准确检测CTC对于肿瘤的早期诊断和分期具有重要价值。目前的检测方法存在诸多不足，本研究制备的功能化尼龙导管有望提高CTC的捕获效率和检测准确性，为临床医生提供更可靠的诊断依据，有助于早期发现肿瘤转移，及时调整治疗方案，提高患者的生存率。

治疗指导方面：CTC的检测还可以用于评估肿瘤患者的治疗效果和预后。通过对治疗前后CTC数量和特征的变化进行监测，可以及时了解肿瘤对治疗的响应情况，指导医生调整治疗策略，实现个体化治疗，提高治疗效果，减少不必要的治疗副作用。

肿瘤研究方面：功能化尼龙导管捕获的CTC可以为肿瘤转移机制的研究提供丰富的细胞资源。对CTC进行深入的分子生物学分析，有助于揭示肿瘤转移的分子机制，为开发新的抗肿瘤药物和治疗方法提供理论基础。

1.3研究内容与创新点

1.3.1研究内容

羧酸甜菜碱两性聚合物功能化尼龙导管的制备：采用原子转移自由基聚合（ATRP）等方法，将羧酸甜菜碱甲基丙烯酸酯（CBMA）单体接枝到尼龙导管表面，制备功能化尼龙导管。通过改变反应条件，如单体浓度、引发剂用量、反应时间等，优化功能化修饰工艺，提高CBMA的接枝率。

功能化尼龙导管的表征与性能测试：运用傅里叶变换红外光谱（FT-IR）、X射线光电子能谱（XPS）、扫描电子显微镜（SEM）等手段对功能化尼龙导管的表面化学结构和微观形貌进行表征。测试功能化尼龙导管的血液相容性，包括溶血率、血小板黏附实验等，评估其在生物体内应用的安全性。

功能化尼龙导管对循环肿瘤细胞的捕获性能研究：将上皮细胞黏附分子（EpCAM）抗体接枝到功能化尼龙导管表面，构建具有特异性捕获CTC能力的功能化体系。通过体外细胞实验，研究