高效液相色谱仪的结构原理及维护保养.pdfVIP

高效液相色谱是一种高效的分离和分析技术，它能够将各种样品中各个不

同的组分迅速分离，然逐一加以定性和定量分析。

一、高效液相色谱分离原理

色谱法是利用物质在两相中吸附或分配系数的微小差异达到分离的目的。

色谱过程中不同组分在相对运动、不相混溶的两相间交换，其中相对静止的一

相为固定相，相对运动的相为流动相。

不同组分在两相间的吸附、分配、离子交换、亲和力或分子尺寸等性质存

在微小差别，经过连续多次在两相间的质量交换，这种性质微小差别是色谱分

离的根本，即必要条件；性质上微小差别的组分之所以能得以分离是因为它们

在两相之间进行了上千次甚至上百万次的质量交换，这是色谱分离的充分条件。

二、高效液相色谱仪结构(以HP1100高效液相色谱仪为例)

包括四元泵、进样器、柱温箱和检测器等几部分。

•HPLC的日常操作条件：

⑴温度：1()—30℃；

⑵相对湿度:80%；

⑶最好是恒温、恒湿，远离高电干扰、高振动设备。

1.由于高效液相色谱柱填料颗粒较小，通过柱子的流动相受到的流动阻力较大，

因此需要用高压泵向柱子提供流量稳定、重现性好的流动相。在HP1100高效液

相色谱仪中使用的是四元泵。

⑴四元泵包括一个溶剂柜、一个真空脱气器和一个四通道的梯度泵。

a.溶剂柜内可放4个1L的溶剂瓶，用于存储足够量的、符合高效液相要求的流

动相。

b.真空脱气器对进入四元泵前的流动相进行脱气，否则流动相流经柱子到检测器

时，会因有气泡而造成基线不稳，检测器噪声增大等现象，使仪器不能正常工

作。

C.四通道的梯度泵包括一个高速配置阀和一个泵部件，溶剂混合是通过高速配置

阀在低压区产生的。

⑵四元泵是一个双通道、双活塞串联的设计，这种设计能满足泵输送溶剂的全

部功能。通过一个可产生高至4（）0bar压力的泵部件，对溶剂进行测量并将溶剂

传输至高压位置。

⑶泵部件包括泵头、一个阻尼器和一个冲洗阀。泵头带有一个含可替换滤芯的

入口主动阀和一个出口阀；阻尼器连接两个泵腔；冲洗阀装在泵的出口处，带

有PTFE滤芯。

*四元泵常见故障的维修

⑴泵的状态指示灯

a.当状态指示灯为OFF且（电源指示灯亮时），四元泵处于一个预运行状态，做

好开分析的准备。

b.状态指示灯为绿色时，说明四元泵正在进行分析运（行模式）。

c.状态指示灯为黄色时，说明泵处于未就绪状态。当四元泵等待达到或完成一个

特殊条件（如：在改变一个选点的瞬间）或正在运行自检程序时，处于未就绪

状态。

d.当状态指示灯为红色时，说明泵处于故障状态。一个故障状态说明四元泵已经

检测到一个内部故障，该故障影响了四元泵的正确操作。通常，故障状态应引

起重视（如：泄漏、内部元件损坏）。故障状态总是会使分析中断。

e.状态指示灯为黄灯闪烁时，说明仪器处于驻留模式。在此情况下即需维修。

£状态指示灯为红灯闪烁时，说明泵在启动时有严重故障。需及时维修。

⑵故障信息

当出现电路、机械和液压（流路）故障时，在用户界面上就会出现故障信

息，在用户继续进行分析前应引起必要注意（如：修理、更换滤芯或更换必要

的消耗品）。出现此类故障时，四元泵前面板上的红色状态指示灯亮起，并在仪

器的日志上写下一条记录。

⑶泄漏

从两个温度传感器发出的信号（泄漏传感器和面板式温度补偿传感器）被

泄漏算法用来确认泄漏是否发生。当出现一个泄漏时，泄漏传感器将被溶剂冷

却。这将改变泄漏传感器的电阻，该信号被LPM板上的泄漏传感器电路获得。

*可能的原因解（决办法）

a.接头松动；（拧紧）

b.毛细管破裂：（更换）

c.冲洗阀、入口主动阀或出口球阀松动或泄漏；（确保泵体各构件位置正确。若

仍泄漏，更换适当的密封圈，如：冲洗阀、入口主动阀、出口球阀）

d.泵密封圈损坏。（更换泵密封圈）

e.泄漏传感器断路或短路

通过泄漏传感器的电流大小取决于温度。当出现泄漏时溶剂使泄漏传感器冷

却，使传感器电流在设定限度内变化。如果电流值低于电流下限（断路）或高

于电流上限（短路），就会产生故障信息。

*常见故障现象

⑴输液不稳，并且压力波动较大

b.气泡从输液入口进入泵头

c.单向阀粘连或损坏

清洗或更换单向阀。

⑶实际流速低于设定