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第56讲动物细胞工程

考点一动物细胞培养

1.动物细胞培养的概念:从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。

2.动物细胞培养的条件

3.动物细胞培养的过程

4.干细胞的培养及其应用

(1)功能:干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞,与组织、器官的发育、再生和修复密切相关。

(2)来源:早期胚胎、骨髓和脐带血等。

(3)分类:包括胚胎干细胞和成体干细胞等。

1.(选择性必修3P45思考·讨论)幼龄动物的细胞比老龄动物的细胞更容易进行动物细胞培养。(√)

2.(选择性必修3P44旁栏思考)进行动物细胞培养时常用胃蛋白酶将其分散成单个细胞。(×)

3.(选择性必修3P44正文)体外培养的动物细胞一类能悬浮在培养液中生长增殖,另一类需要贴附于某些基质表面才能生长增殖。(√)

4.(选择性必修3P45正文)人们通常将动物组织经蛋白酶处理后的初次培养称为原代培养,分瓶后的细胞培养称为传代培养。(√)

5.(选择性必修3P46正文)干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中。(√)

6.(选择性必修3P43从社会中来)用烧伤病人自体皮肤的单个细胞培养出的皮肤进行自体移植可避免免疫排斥反应。(√)

【探究】动物细胞培养的条件和过程

结合下面动物细胞培养过程,探究以下问题:

(1)动物细胞培养取材时,一般是取胚胎组织或幼龄动物的组织或器官,请解释原因。

提示:胚胎组织或幼龄动物的组织或器官分裂、增殖旺盛。

(2)进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶可以吗?为什么?

提示:蛋白质。不可以。多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4,胃蛋白酶(适宜pH约为2)在此环境中没有活性,而胰蛋白酶或胶原蛋白酶在此环境中活性较高,因此胰蛋白酶或胶原蛋白酶适用于细胞培养时的处理。

(3)培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂增殖?

提示:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞停止分裂增殖。

【归纳总结】

1.动物细胞培养和植物组织培养的比较

项目

动物细胞培养

植物组织培养

理论基础

细胞增殖

植物细胞的全能性

培养前处理

无菌;用机械的方法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理,使组织分散成单个细胞

无菌、离体

取材

动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织

植物幼嫩的部位或花药等

培养基性质

液体

固体

续表

项目

动物细胞培养

植物组织培养

培养基成分

糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等

水、矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素和琼脂等

结果

产生大量细胞,不形成新个体

可产生新个体

应用

人造皮肤的构建、动物分泌蛋白的规模化生产

快速繁殖、作物脱毒、细胞产物的工厂化生产和单倍体育种等

相同点

①都需人工条件下的无菌操作;②都需要适宜的温度、pH等条件;③都进行有丝分裂,都不涉及减数分裂

2.诱导多能干细胞(iPS细胞)及其应用

1.如图所示为动物细胞培养的基本过程,下列关于甲、乙、丙、丁四个操作过程的叙述,正确的是()

A.甲过程可选取动物个体的任何组织细胞

B.乙过程可用纤维素酶和果胶酶处理细胞

C.丙过程所用培养液中需添加动物血清

D.丁过程中的细胞因接触抑制而大量死亡

解析:C甲过程应选取幼龄动物的器官或组织,A错误;乙过程可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理细胞,B错误;由于人们对细胞所需的营养物质尚未完全研究清楚,因此在使用合成培养基时,通常需要加入血清等一些天然成分,C正确;丁过程中的细胞因接触抑制而影响细胞增殖,并不会大量死亡,D错误。

【归纳总结】

动物细胞培养过程中,使组织分散成单个细胞的目的是使细胞与培养液充分接触,保证细胞所需氧气和营养的供应;保证细胞内代谢物及时排出。

2.(2024·浙江名校协作体高三开学考)下图为动物细胞培养过程中细胞的增殖曲线。下列叙述错误的是()

A.图中A点进行的是细胞的原代培养

B.B点无需使用胰蛋白酶处理细胞

C.B点到C点过程中进行了多次传代培养

D.D点以后的细胞具有无限增殖的特点

解析:B由图可知,在B点时更换了培养基,因此A点时为原代培养,A正确;B点时更换培养基,需要让细胞从培养瓶上剥离,因此需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理,B错误;BC段增殖代数较多,显然进行了多次传代培养,C正确;由图可知,D点后可无限增殖,D正确。

方法规律

区分原代培养和传代培养的关键是看用胰蛋白酶处理的对象和是否分瓶:

(1)分瓶前,第一次用胰蛋白酶对动物组织进行处理后的培养是原代培养。

(2)第二次用胰蛋白酶处理,使细胞从瓶壁上脱离下来,分瓶后的细胞培养为传代培养。

考点二动物细胞融合技术与单克隆抗体

1.动物细胞融合技术

【教材拾遗】(选择

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