DB43∕T 701-2012 饲料中硝呋烯腙的测定 高效液相色谱法.docxVIP

ICS65.120

B46

DB43

湖南省地方标准

DB43/T701—2012

饲料中硝呋烯腙的测定高效液相色谱法

DeterminationofNitrovininfeeds

Highperformanceliquidchromatographicmethod

务平台

2012-07-24发布--20121210实

2012-07-24发布

--

湖南省质量技术监督局发布

DB43/T701—2012

目次

前言 Ⅱ

1范围 1

2规范性引用文件 1

3原理 1

4试剂和材料 1

5仪器和设备 2

6采样 2

7测定步骤 2

8结果计算和表达 3

9检测方法灵敏度、准确度、精密度 3

附录A(资料性附录)硝呋烯腙高效液相色谱图 4

工

Ⅱ

DB43/T701—2012

前言

本标准按GB/T1.1—2009的规则编制。

本标准由湖南省畜牧水产局提出并归口。

本标准起草单位：湖南省畜禽水产品质量检验检测中心、湖南省兽药饲料监察所。

本标准主要起草人：谭美英、易建希、陈福华、邓云波、肖安东、隆雪明、周玉洁、匡光伟、徐丽枚、宋跃君、邓昉、何红艳。

DB43/T701—2012

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饲料中硝呋烯腙的测定高效液相色谱法

1范围

本标准规定了饲料中硝呋烯腙高效液相色谱的测定方法。

本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和添加剂预混合饲料中硝呋烯腙的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件；凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T14699.1—2005饲料采样

3原理

采用二甲亚砜-乙腈溶液提取试样中的硝呋烯腙，混合型阳离子固相萃取柱净化，氨化二甲亚砜-乙腈溶液洗脱，高效液相色谱(紫外检测器)测定，外标法定量。

4试剂和材料

除另有说明外，所用试剂均为分析纯，实验用水应符合GB/T6682一级水的规定。

4.1氨水。

4.2二甲亚砜色谱纯。

4.3乙腈色谱纯。

4.4缓冲溶液：称取3.034g庚烷横酸钠和3.152g一水合柠檬酸，用水溶解并定容至1L,用三乙胺调节PH至2.5。

4.5流动相：缓冲溶液+乙腈=55+45。

4.6提取液(二甲亚砜-乙腈溶液):将40mL二甲亚砜与60mL乙腈混合均匀，即得。

4.7洗脱液(4%氨水-二甲亚砜-乙腈溶液):将4mL氨水与96mL二甲亚砜-乙腈溶液混合均匀，即得。

4.8硝呋烯腙对照品：含硝呋烯腙应大于98%。

4.9标准储备液的配制：称取硝呋烯腙对照品0.01g(精确到0.00001g),置于10mL容量瓶中，加适量二甲亚砜超声溶解并用乙腈定容。配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备溶液。4℃以下避光可保存3个月。

4.10标准工作溶液的配制：准确移取适量硝呋烯腙标准储备液，用流动相分别稀释配成0.5、1.0、2.5、5.0、10.0、25.0、50.0ug/mL的标准工作液。

4.11微孔滤膜：0.45um,有机膜。

4.12SPE柱(混合型阳离子固相萃取柱):60mg/3mL。

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DB43/T701—2012

5仪器和设备

5.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器。

5.2分析天平：感量0.00001g和0.001g。

5.3固相萃取装置。

5.4旋涡混匀器。

5.5离心机。

5.6超声波清洗机。

6采样

6.1采样步骤：按GB/T14699.1-2005的规定执行。

6.2试样的制备：将采集的饲料样品，用四分法缩减分取200g,粉碎过0.45mm孔径的筛，充分混匀，装入磨口瓶中备用。

7测定步骤

7.1样品提取

称取试样5g(精确到0.001g),置于50mL离心管中，加入25.0mL提取液，涡旋混合均匀，超声提取10min,6000r/min离心10min,取上清液于具塞试管中，重复上述操作，合并两次上清液，旋涡混匀，备用。

7.2净化

将SPE柱依次用乙腈5mL、二甲亚砜-乙腈溶液5mL活化，取上述提取液(配